细胞转染效率的检测方法有哪些？
1. 实时定量PCR检测
实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-time PCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。但是，荧光定量PCR所检测的是转染后细胞中待测基因的mRNA的表达水平，对于目的基因的蛋白表达水平不能够检测
2. Western Blot检测
Western Blot又称蛋白质免疫印迹（免疫印迹实验），其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或者生物组织样品进行着色，并通过分析着色的位置和着色的深度获得特定蛋白在所分析的细胞或者组织中表达情况的信息。Western Blot所检测的是组织或者细胞中蛋白质的表达水平。
3. 流式细胞术
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种在功能水平上对细胞或者其他生物粒子进行定量检测和分析的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中检测得到多个参数，与传统检测方法相比具有更加快速、准确以及定量等特点。使用流式细胞术检测转染效率可以更加精que的确定转染的效率，对转染效率进行量化。
4. 荧光显微镜观察
当我们转染的质粒DNA含有荧光蛋白基因是可以通过荧光显微镜观察的方法来确定转染的效率，在荧光显微镜下，可以观察到荧光的强弱以及荧光的效率。
细胞转染效率的主要影响因素？
1. 细胞密度
一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。
2. 细胞状态
这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。
还有，尽量选择无支原体污染的细胞，支原体污染是肉眼看不到的，可用支原体检测试剂盒进行检测，确保无支原体污染。
3. 细胞种类
不同细胞种类的细胞在做转染时所需要的转染体系是不同的，不能一种体系用在所有类型细胞的转染实验。
4. DNA纯度
在制备高纯度DNA时，还需要对DNA进行内毒素的去除，内毒素的存在会造成细胞毒性，严重影响转染效率，现在市面上有很多去除内毒素的DNA纯化试剂盒可供选择。
5. 转染试剂
脂质体试剂的毒性大，尽量选用脂质体的转染试剂，如Entranster试剂；另外，在大规模使用前，需进行转染试剂和核酸最优比例的摸索。
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