ATAC-seq ——转录调控研究神器

作者: 黄晶_id | 来源:发表于2019-03-07 20:47 被阅读47次

    问:“ 我用ATAC-seq能干啥?”

    ATAC-seq能回答以下三个问题:
    1.找调控某一生物学过程的关键转录因子
    2.找哪个转录因子调控了我感兴趣的基因
    3.找我感兴趣的转录因子调控的靶基因

    1.找关键调控因子

    问:适用于啥样的问题?
    答:两种或几种状态的sample,想知道是哪些转录因子引起的状态差异。

    用ATAC-seq标出早期胚胎发育各时期的开放染色质区域,找出差异,查看差异开放染色质区域富集了哪些转录因子的motif,这些转录因子就是调控2细胞期→4细胞期→8细胞期→囊胚期这一发育过程的关键转录因子

    image.png

    通过这种方式,找到了这几个关键的调控因子,对其中的Nr5a2进行深入研究。

    image

    对比Knockdown前后的RNA-seq数据,确认NR5A2是早期胚胎发育中重要的调控因子。

    image

    2.谁调控了我感兴趣基因?

    这个问题,给出三个解决方案。

    • Plan A:基于大量ChIP-seq公共数据挖掘

    • Plan B:motif分析预测

    • Plan C:ATAC-seq结合motif分析

    看一下Plan C:ATAC-seq + motif分析的模式图

    image

    单做motif分析也能做这事儿啊!

    为啥还要做ATAC-seq呢?

    motif分析只能标出某基因上游启动子区域有哪些TF的motif,这些TF不一定真的能跑来结合。用ATAC-seq标出这里有蛋白结合,但不知道具体是哪个转录因子。

    ATAC-seq + 某个基因上游的motif分析,准确找到基因上游结合的转录因子。

    3.转录因子的靶基因是谁

    优先推荐用ChIP-seq找转录因子的靶基因,即Plan A。

    再结合TF KD/KO/过表达或激活sample的RNA-seq,能够更准确找到转录因子靶基因

    如果没有ChIP级别的抗体,无法做ChIP-seq,就退而求其次,用ATAC-seq找转录因子的靶基因。用ATAC-seq标出基因组范围哪里有调控蛋白结合,再标出哪里有某个TF的motif,二者相叠加,就能推测出这个TF调控的靶基因。

    点击查看原文

    相关文章

      网友评论

        本文标题:ATAC-seq ——转录调控研究神器

        本文链接:https://www.haomeiwen.com/subject/ogghpqtx.html