sanger测序原理

视频：https://www.youtube.com/watch?v=FvHRio1yyhQ
sanger测序
sanger是第一代测序，它是使用的链终止法。下面我来说说我的理解。 当你拿到你需要测定的测序后（一般sanger测序为几百bp），

• 首先，加热变性使双螺旋解螺旋，然后将引物结合到一条链上，如图：

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• 将结合了引物的序列等量放入4个反应体系中，然后将dna聚合酶和dNTPs加入各个反应体系中；
• 下一步，也是最关键的一步，在四个不同的反应体系中分别加入A,T,C,G四种带荧光标记的3'端被去OH的ddNTP，将体系混合（用来终止各个反应）
• 将反应结束的四个体系进行电泳（这种电泳的精度很高，可以精确到1个bp），然后就可以根据结果来进行来确定dna序列的碱基序列（越轻的dna片段跑得越快，所以从下往上读）

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参考：https://zhuanlan.zhihu.com/p/51763314