BCA测蛋白浓度

1. 蛋白标准品配制
   1ml蛋白标准配制液
   20mg蛋白标准(BSA)
   ↓
   20mg/ml蛋白标准溶液
   ↓
   稀释40倍。20ul+780ulRIPA
   ↓
   0.5mg/ml蛋白标准品
   －20度保存
2. BCA工作液配制
   BCA试剂A：所有孔数*200+200
   B:A/50
   混匀
3. 96孔板加样。

96板[,1:3]=蛋白标准品+pbs
96板[,4:6]=样品

• 标准品 + PBS	浓度
  A: 0+20	0
  B: 1+19	0.025
  C: 2+18	0.05
  D: 4+16	0.1
  E: 8+12	0.2
  F: 12+8	0.3
  G: 16+4	0.4
  H: 20+0	0.5

• 加pr样：若稀释20倍，则1ul样+19ulPBS（样本每孔加20ul, 3个副孔）
• 加BCA工作液每孔200ul（所有孔都加，蛋白标准品和PBS都要加）

4. 37度放置30min.

5. 冷却至室温测A562(浓度梯度 0,25,50,100,200,300,400,500)
   结果取平均值，样本蛋白浓度=测出来的浓度平均值*20