CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）是生命进化历史上，细菌和病毒进行斗争产生的免疫武器，简单说就是病毒能把自己的基因整合到细菌，利用细菌的细胞工具为自己的基因复制服务，细菌为了将病毒的外来入侵基因清除，进化出CRISPR系统，利用这个系统，细菌可以不动声色地把病毒基因从自己的染色体上切除，这是细菌特有的免疫系统。微生物学家10年前就掌握了细菌拥有多种切除外来病毒基因的免疫功能，其中比较典型的模式是依靠一个复合物，该复合物能在一段RNA指导下，定向寻找目标DNA序列，然后将该序列进行切除。许多细菌免疫复合物都相对复杂，其中科学家掌握了对一种蛋白Cas9的操作技术，并先后对多种目标细胞DNA进行切除。这种技术被称为CRISPR/Cas9基因编辑系统，迅速成为生命科学最热门的技术。
海星生物技术团队自主研发的基因编辑系统——ClonePlus™技术和VIRUS-Free™技术，为您的课题保驾护航。
ClonePlus™技术
ClonePlus™技术：是Cas9X技术平台研发的专有高效细胞敲除的新技术，主要通过高通量电转系统和高通量的克隆分选技术结合，获得基因编辑的单细胞，其克隆形成率可以达98%，就算是克隆形成率低的细胞株也能获得敲除单克隆，针对悬浮细胞也有更高的单克隆形成率。
轻松帮您实现细胞系（Cell Line）、永生化细胞（Immortalized Cell）、干细胞（Stem Cell）的基因编辑，无论是悬浮细胞（THP-1、K562、U937、Jurkat等）还是贴壁细胞（Hela、HEK293、HepG2等）或是易分化的细胞（MSCs、NSC、ES、BV2等）。
VIRUS-Free™ 技术
VIRUS-Free™ 是一种利用转座子进行细胞稳转株的构建和筛选的技术，以替代慢病毒感染构建稳转细胞株的技术。其载体中包括了转座子的识别区域，能将目的片段从载体上或者BAC分子上切割下来形成一个小环结构，并在基因组里面的固定序列位置进行插入，从而实现稳转。
目前已经在CAR-T细胞治疗中得到较多的临床应用，并充分体现出其：低成本、高效率、基因表达稳定的特点。
海星生物通过不断探索，开发的VIRUS-Free技术通过构建转座系统质粒，将质粒转染细胞，在转座酶的作用下，高拷贝的Cas9蛋白与sgRNA表达元件被整合到基因组上，比传统的病毒法节省了3-4周，价格节省了约40%。
部分成功案例
案例1：THP-1细胞基因敲除(KO）
敲除基因：A基因；敲除区域：Exon 1~13；
敲除片段大小：~30 Kb
客户反馈的验证结果：mRNA水平检测和蛋白水平检测均显示目的蛋白已经完全敲除
案例2：SiHa细胞基因敲除（KO）
敲除基因：C基因；敲除区域：Exon 4；
敲除片段大小：2.4 Kb
客户反馈的验证结果：mRNA水平检测和蛋白水平检测均显示目的蛋白已经完全敲除
网友评论