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发酵乳制品检查用的一款显色培养基

发酵乳制品检查用的一款显色培养基

作者: WZ威正翔禹 | 来源:发表于2019-06-03 15:06 被阅读0次

    发酵乳制品在乳制品中有重要位置,近年来备受关注。其中,在发酵菌中的明串珠菌对发酵乳制品的风味、组织状态有重要影响。在乳制品中,明串珠菌主要和乳球菌共同参与发酵过程。前者发酵柠檬酸产生挥发性芳香物质,后者发酵乳糖产酸。而且在奶油发酵剂中,乳球菌产酸对明串珠菌转柠檬酸为芳香物质是十分必要的。

    那么,如何去检查这些菌呢?2006年国际上颁布了ISO

    17792:2006标准,规定了奶、奶制品和中温发酵剂中柠檬酸发酵乳酸菌计数的方法和流程。该ISO指出,柠檬酸发酵菌包括同型发酵和异型发酵乳酸菌,它在选择性培养基上形成0.5~1.2mm扁平菌落。最常见的柠檬酸发酵菌为(1)乳球菌:包括乳酸乳球菌乳酸亚种二乙酰生物变种。其外观为球状(0.4~1.0μm),两两排列或链氏排列,无芽孢,革兰氏阳性,无动力,过氧化氢酶阴性;(2)明串珠菌:包括肠膜明串珠菌乳脂亚种、肠膜明串珠菌肠膜亚种、肠系膜明串珠菌右旋糖酐亚种、乳明串珠菌。明串珠菌通常为球状或扁平状(0.4~0.5μm),两两或成串排列。无芽孢,革兰氏阳性,无动力,过氧化氢酶阴性。

    ISO17792:2006推荐的培养基是改良型Nickels and Leesment培养基,取样接种后在25℃培养72h,即可用于计数“柠檬酸发酵菌”(有光晕)和“柠檬酸非发酵菌”(无光晕)。在培养基中添加X-gal后需氧室温培养24h,可进一步鉴别“乳酸乳球菌乳酸亚种二乙酰生物变种”(白色菌落,有光晕)和“明串珠菌属”(蓝色菌落,可有光晕或无光晕)。而“乳酸乳球菌乳酸亚种”和“乳酸乳球菌肠系膜亚种”均为白色菌落,没有光晕。而将Nickels

    and Leesment培养基添加万古霉素,需氧25℃培养3~5天,可用于明串珠菌计数。

    世界知名培养基生产商HiMedia公司提供有HiCromeTM Nickels and Leesment HiVegTM 培养基,货号MV1712,该培养基遵循ISO17792:2006的配方组成和性能,并可选择使用添加剂万古霉素(货号FD245)。其培养结果和ISO标准中的完全一致。而且,该显色培养基不含动物源性成分,避免了疯牛病等病毒风险,安全性能更高。

    图. HiCromeTM Nickels and Leesment HiVegTM 培养基上的肠膜明串珠菌

    ISO17792:2006还特别指出,对于奶酪样品要特别注意,一些乳杆菌,足球菌、某些嗜热链球菌菌株也形成蓝色菌落。许多乳杆菌和一些足球菌也利用柠檬酸而产生光晕。它们在菌落周围产酸,使柠檬酸溶解,导致假阳性。因此,对于某些显色菌落或有光晕的菌落,还应进行进一步的验证。

    ISO17792:2006还提到了在该培养基中加入制备的起始发酵剂培养基。即,将灭菌脱脂奶中的发酵剂在25℃培养24小时,过滤并将过滤液在115℃灭菌15分钟,祛除沉淀,并再次灭菌200ml过滤液,随后可加入到培养基中。

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