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Cytoskeleton肌动蛋白(牛心脏 muscle)实验原理

Cytoskeleton肌动蛋白(牛心脏 muscle)实验原理

作者: 492ffccb6b29 | 来源:发表于2022-05-17 17:22 被阅读0次

Cytoskeleton肌动蛋白(牛心脏 muscle)实验原理科普:

1、Cytoskeleton肌动蛋白(牛心脏 muscle)来源

用Pardee和Spudich法从牛心肌中纯化肌动蛋白。牛心脏肌动蛋白由84%的α心脏肌动蛋白和16%的α骨骼肌动蛋白亚型组成,分子量约为43 kDa。牛心脏肌动蛋白纯度大于99%,以白色冻干粉末的形式提供。

肌动蛋白(牛心脏 muscle)

2、Cytoskeleton肌动蛋白(牛心脏 muscle)储存

短暂离心以收集管底部的产品。冻干蛋白质在4°C条件下干燥至<10%湿度时,可稳定储存6个月。应使用100l蒸馏水将蛋白质重组至10 mg/ml。然后将蛋白质放入以下缓冲液中:5 mM Tris-HCl pH 8.0、0.2 mM CaCl2、0.2 mM ATP、5%(w/v)蔗糖和1%(w/v)右旋糖酐。然后将浓缩的蛋白质等分为实验量,在液氮中快速冷冻,并在-70°C下储存。如果在-70°C下储存,蛋白质可稳定6个月。对于工作浓度,应使用普通肌动蛋白缓冲液进一步稀释蛋白质,补充0.2 mM ATP和0.5 mM DTT。肌肉肌动蛋白是一种不稳定的蛋白质,应小心处理,避免反复的冻融循环。

3、Cytoskeleton肌动蛋白(牛心脏 muscle)实验设备

(1)4°C下的微凝胶

(2)Beckman Airbuge和Ultra Clear 离心管,贝克曼超离心机和SW 55钛转子超清晰 离心管(类别#344718)和适配器(第356860类)或其他能够以100000 x g离心200l的超离心机。

(3)分光光度计能够在600℃下测量吸光度纳米。

以上就是关于Cytoskeleton肌动蛋白(牛心脏 muscle)的相关实验科普,资料来源于艾美捷科技。

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