美文网首页
人鼻咽上皮细胞(NP69)培养常见问题及解决办法

人鼻咽上皮细胞(NP69)培养常见问题及解决办法

作者: HyCyte海星 | 来源:发表于2023-10-26 14:37 被阅读0次

    NP69人鼻咽上皮细胞基本信息

    细胞名称:人鼻咽上皮细胞 (STR鉴定正确)

    细胞别名:NP69SV40T,NP-69

    产品货号:TCH-C440

    种属来源:

    组织来源:鼻咽

    疾病特征:

    细胞形态:上皮细胞样

    生长特性:贴壁生长

    培养体系:NP69专用基础培养基+1%生长因子+1%P/S

    配套培养基货号:TCH-G440

    传代比例:1:2-1:4,每2-3天换液一次

    传代周期:24-48 h

    培养条件:气相:94%空气+6%CO2,温度:37℃

    NP69细胞培养要点

    ① 该细胞对培养基要求较高,推荐培养基为NP69专用培养基+1%生长因子+P/S,不能与其他培养基体系共用。

    ② 该细胞传代或复苏之后可能需要2天及以上才能完全贴壁,完全贴壁前尽量少移动细胞,换液时动作要轻,切勿使劲冲洗细胞。

    ③ 细胞冻存需用无血清冻存液,推荐一步冻存液无需程序降温盒,-80℃放置24h后,转移至液氮长期储存。

    NP69细胞常见问题与解决方法

    问题1:培养细胞死亡

    可能原因:

    ①  胰蛋白酶消化过度

    ②  支原体污染

    ③  消化液或培养液配置错误、过期储存或储存不当

    ④  细胞老化(如传代前细胞汇合度过高会导致其失去贴附性)

    ⑤  接种细胞起始浓度太低或太高

    建议解决办法:

    ①  缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度,建议加入0.25%提前预热

    的胰酶置于37℃消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细

    胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化)

    ②  分离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物并对实验环境进行消毒灭菌

    ③  重新配置消化液或培养液

    ④  启用新的保种细胞

    ⑤  调节最佳接种细胞浓度

    问题2:细胞复苏失败

    可能原因:

    ①  可能是未使用专用培养基复苏细胞

    ②  细胞复苏时解冻时间过长导致细胞死亡

    ③  细胞冻存前是否过密

    建议解决办法:

    ①  推荐使用海星NP69细胞专用培养基,货号:TCH-G440

    ②  细胞复苏动作要快,手法要轻柔

    ③  在细胞冻存前调整合适的细胞密度

    相关文章

      网友评论

          本文标题:人鼻咽上皮细胞(NP69)培养常见问题及解决办法

          本文链接:https://www.haomeiwen.com/subject/jknyidtx.html