DESeq2常常用于RNA-Seq数据分析,也有用于微生物组数据分析的。DESeq可以直接处理FPKM、FTPM、TPM及CPM数据,在处理微生物数据时用OTU数据。
本贴就简单说说DESeq2是如何校正数据的。
假设有2个样本,6个基因:
样本信息可以发现每个基因在样本2中的表达量都是样本1中的2倍。这个很可能不是由于样本本身的生物学因素引起的,而是由于测序的深度等影响的。需要对样本基因的表达量进行校正。
Step1:取对数值
假设有如下的基因表达情况:
先对每个表达量取以e为底数的对数:
Step2:求每个基因表达量的均值
对每个基因(没行)求均值:
Step3:筛选表达量非零的基因
基因A在取对数值后出现负无穷大,所以将这个基因暂时剔除。
Step4:求表达量的中位数
求出每个样本基因表达的中位数:
Step5:求出scaleing factor
根据公式求出每个样本基因表达量的scaleing factor。
Step6:每个表达量的值除以scaleing factor
将每个样品中每个基因的表达量除以样品对应的scaleing factor即可。
参考文献
[1] EDWARDS J, JOHNSON C, SANTOS-MEDELLíN C et al. Structure, variation, and assembly of the root-associated microbiomes of rice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2015: 112: E911-E920.
致谢:感谢StatQuest视频栏目。
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