本文选自Am J Cancer Res ，喜欢的朋友可以自行下载阅读。
没想到还在纸上设计的实验就这么被抢发了。还好做的比较水，让我好好给他包装一下。
摘要：ADP核糖基化因子6（ARF6）是RAS超家族的一部分，它调控着小泡运输、膜脂重构和信号传导途径。我们先前的研究发现ARF6作为Kras/ERK信号通路的下游，可以促进胰腺癌细胞的增殖和Warburg效应。此外，ARF6有望成为预测胰腺癌预后的生物标志物。铁死亡是一种新定义的铁依赖型非凋亡性细胞死亡，与Kras突变密切相关。因此，进一步探讨ARF6与铁性上睑下垂的关系已迫在眉睫。我们的研究表明，ARF6不直接调节脂质过氧化，但使胰腺癌细胞处于对氧化应激特别是RSL3诱导的脂质过氧化敏感的状态。进一步的研究表明ARF6也可以通过多种途径调节吉西他滨耐药。总之，ARF6对胰腺癌的发展有着深远的影响。
作者上来就把ARF6敲了，看看对铁死亡诱导的敏感情况变化。对erastin似乎没有什么改变，但还对RSL3似乎有点作用。
进一步研究发现敲了ARF6后并没有导致ROS升高，而是增加了FERROPTOSIS的敏感性。
紧接着看看铁死亡关键蛋白的变化，发现ACSL4高表达。但这种高表达似乎是为了ACSL4的稳定性引起的。并且在敲除ARF6后诱导铁死亡增加抑制铁死亡会减少死亡，同时，敲掉ARF6会减少SCD1的表达，加入SCD1的终产物会促进改善铁死亡。（俗套，都是验证过的东西了，没有创新性）
文章都快结束才扯到吉西他滨上来，加入吉西他滨后MDA升高，敲除ARF6会增加吉西他滨诱导的MDA升高，抑制ROS会引起吉西他滨诱导的脂质过氧化减轻，说明抑制铁死亡会减轻吉西他滨的敏感性，ARF6沉默显著减轻吉西他滨耐药，但ROSI仅部分逆转了这一现象，然后，作者又测了和吉西他滨耐药相关的基因，发现敲减后DCK和hENT1升高了，但是mRNA水平并没有改变，说明蛋白的稳定性改变了。我感觉这个ARF6的功能是不是就是促进这几个蛋白降解的，作者按照这个角度去找应该可以发个更好的文章吧，在找到作用位点，在突变作用位点，这机制绝了。
作者不甘寂寞的在组织中测了测ARF6和ACSL4，看了他们的相关性，
全剧终，这做的什么，东拼西凑，总体来说乱，我看完一遍没明白作者的重点是什么。一会讲铁死亡，一会讲耐药，机制也没有，全是表型，不知道拿出RSL3来作者想说明什么问题，可能也就值这2-3分的文章了吧，这个课题如果是我来做的话会是这么个样：1.既然做铁死亡和耐药，那首先看看两者有没有联系，2.吉西他滨诱导以后看看铁死亡过程中哪些关键基因发生了变化 3.通过过表达或者抑制这个基因验证关键基因的变化与吉西他滨诱导的死亡的关系 4.在探讨这个基因的改变与吉西他滨耐药的机制性问题，可以做RNA-seq或者干脆做蛋白质组学，找到和耐药相关的关键蛋白变化，5.在验证铁死亡关键基因与耐药关键基因之间的调控关系，6.在临床上进一步验证这两个基因的关系以及耐药与铁死亡的关系。
这么做的话，别的不说，至少5分算是有了。如果在动物上在做做文章，把机制再深入一下，上10分也是有可能的。欢迎批评、指正。
网友评论