美文网首页
免疫组化结果判断的基本原则

免疫组化结果判断的基本原则

作者: 7aabdaa41cae | 来源:发表于2018-06-15 17:28 被阅读59次

免疫组织化学(简称免疫组化)是组织化学的一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜观察其颜色的变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的化学成份或化学性质。免疫组化标记具有形态学特点,若能熟练掌握则有助于对免疫组化标记结果的正确判断,现择要分述如下:

一阳性标记色度特征

免疫组化标记时细胞阳性着色程度取决于抗原含量、分布密度和标记方法及其敏感性。一般而言,抗原含量越多,分布密度越高,标记方法越敏感,阳性结果显色则越强。根据阳性标记的显色程度分为:淡黄色,提示为弱阳性;棕黄色,为中等度阳性;棕黑色,示为强阳性。在结果判断中,后两者较有意义,可作为判断依据。而前者除考虑标本处理和方法学因素外,可能与细胞只有轻度异常表达,或某些细胞摄取了周围组织抗原之故。

二阳性标记细胞学特征

免疫组化标记中,阳性标记细胞学特征是反映抗原在细胞中的定位和分布情况。在诊断中阳性细胞以拟标记的细胞为前提,阳性表达必须在细胞特定的抗原部位,若不在抗原所在部位的阳性表达和非目标细胞即使阳性也不应作为判断依据。根据抗原在细胞中分布和阳性颗粒沉淀部位可分为以下5种类型:

1.胞膜型  阳性颗粒主要分布于细胞膜表面,形成一薄层棕黄色颗粒包绕整个细胞。此类型常见于某些膜抗原,如上皮膜抗原(EMA)、白细胞共同抗原(LCA)及B细胞、T细胞、粒细胞相关抗原(GAA)和Ki-1等。

2.胞核型  阳性颗粒定位于细胞核,呈均匀分布或位于核膜下,有的呈小斑块状不规则分布。此多见于增殖细胞核抗原、Ki-67及激素受体中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和基因p53等。

3.胞浆型  阳性颗粒主要分布于细胞浆。大部分抗原均属于此种类型,如细胞角蛋白、波形蛋白、结蛋白、神经丝蛋白、肌红蛋白、α1-抗胰糜蛋白酶及前列腺特异性抗原(PSA)等。依据抗原在胞浆内分布形式,通常表现为弥漫性分布或局限性分布。前者阳性颗粒弥漫而均匀地分布于整个细胞浆。局限性是指阳性颗粒呈小斑点状或斑块状局限于细胞浆中的某一部位、核周或细胞浆的一侧。

4.微绒毛型  抗原颗粒主要分布于腺癌细胞的微绒毛,而胞浆和胞膜可以是阳性或阴性表达。这种表现形式最常见于各种腺癌,如甲状腺癌、乳腺癌、胃肠腺癌、胆道腺癌、等。其特点是阳性颗粒除靠近腔面阳性外,其余基底部可呈阴性反应。

5.复合型  在常规免疫组化标记中,同一种抗原可以同时表达于胞膜和胞浆、胞核和胞浆,但很少发现胞膜和胞核同时表达。值得注意的是组织标本固定不及时造成抗原移位使胞核和胞浆同时阳性。

三非特异着色特征

以下情况可干扰免疫组化标记结果的观察和判断:

(1)抗体交叉反应:  是由于该抗原决定簇同时存在于多种组织细胞,如GFAP可同时存在于星形胶质细胞和唾液腺肌上皮。S-100蛋白则更为严重,可表达于多种组织细胞。因此,应全面了解和认识该抗体的功能和标记范围。故抗体交叉反应只要应用得当仍有助于诊断。

(2)非特异性染色  是指抗原无明确定位,肿瘤细胞与间质细胞、细胞与间质均为黄色,相互累及一片,色度无深浅之分。这种标记组织片不能作为免疫组织标记结果判断依据。

非特异性染色的原因常为组织标本固定不佳、抗体质量问题或稀释度不合理及操作方法不规范等。因此,免疫组化特异性染色定位非常重要,如前所述,阳性颗粒应位于细胞胞膜、胞浆或胞核,阳性细胞与阴性细胞相互交杂,阳性染色强度深浅不一。如果缺乏细胞间的不均一性染色,即是呈阳性染色,常提示为非特异性染色。

免疫组化结果的判断原则及对假阴性和假阳性的认识

一免疫组化结果的判断原则

免疫组化具有特异性强、敏感性高及定位正确等优点,但随着免疫组化应用的普及和深入,越来越多的问题也随之出现。因此,掌握对免疫组化结果的判断原则是很重要的。

[if !supportLists]1.    [endif]必须设染色对照  每批染色都要以特异性的阳性对照和阴性对照为基础,才能对染色结果做出正确的判断。没有阳性对照,就不能做出真正阴性结果的判断;同理,没有阴性对照,也就不能做出真正阳性结果的判断。因而,没有对照的免疫组化染色,即使做出了判断也是不可信的。

相关文章

  • 免疫组化结果判断的基本原则

    免疫组织化学(简称免疫组化)是组织化学的一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记...

  • 祝一切安好

    一早接到医院打来的电话,说我前天的病理标本需要加做四个免疫组化。 接完电话我有点绷不住。免疫组化一般是为了判断肿瘤...

  • 蛋白表达不同检测方式的比较和分析

    蛋白表达不同检测方式的比较和分析 1、免疫组化法(immunohistochemistry) 原理:免疫组化,是应...

  • 感赏66

    暑假第16天,周二。 今下午陪老爸到川医拿“免疫组化”结果。昨下午医院打来电话说老爸检查结果有问题...

  • 守住幸福6-坦白

    2021年4月19日, 免疫组化的结果出来了,最最最不想看到的结果,三阴性。我的内心是崩溃的,强忍着泪水陪妈妈做完...

  • 免疫组化IPP分析

    背景 1.图片来源。DAB显色的免疫组化图片 2.输出的结果。 3.光密度(OD)反映蛋白的量。 灰度值:黑0--...

  • Locust结果判断

    请求结果统一判断设置容错,错误信息属正常返回,此类情况可将返回指定错误信息的请求结果设置成success设置超时,...

  • 如何进行深度思考?

    背景 熟悉传播学的朋友,一定知道一条基本原则:对于任何事情,我们要尽量关注事实判断,而非价值判断。因为事实判断是确...

  • 守住幸福4-等免疫组化结果

    免疫组化的结果依旧是没有出来,今天没有任何任务,算是休整的一天。 早晨妈妈自己去了病房,病友说护士前天就催缴费了,...

  • 免疫组化原理、流程及结果分析

    免疫组化原理免疫组化染色是用一抗与被检测组织中目的蛋白抗原结合,然后用HRP等标记的二抗与一抗进行结合,最后通过与...

网友评论

      本文标题:免疫组化结果判断的基本原则

      本文链接:https://www.haomeiwen.com/subject/limmeftx.html