ProteinA/G beads

抗体的结构

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二抗的结合

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Protein A与Protein G有何不同？

目前，绝大多数的IgG纯化使用Protein A、Protein G亲和层析，它们是来自于不同微生物的蛋白质，对于IgG具有特异性的亲和作用，而对于其他杂蛋白没有或者只有很弱的结合，因此具有极高的选择性。通常，仅凭Protein A、Protein G一步亲和层析就可达到90%的纯度。但是Protein A、Protein G又有什么不同呢？该如何选择呢？

1.Protein A

Protein A是金黄色葡萄球菌表面的蛋白，分子量42kDa，有5个不同的结构域可以结合IgG的Fc片段，具有很强的特异性亲和力，每个Protein A分子至少可以结合两个IgG分子。同时，IgA、IgM或者IgE也有可能和Protein A结合。

nProtein A：天然Protein A，无动物来源组分，载量约30mg人IgG/ml。

rProtein A：重组Protein A ，C-端新增一个Cysteine，可以单一位点定向偶联于琼脂糖基架上，降低与抗体接触的空间位阻，提高了载量，约50mg人IgG/ml。雅心重组蛋白A为本公司自主研发产品，非抗体柱纯化，产品中无任何其它抗体如IgG等的污染；pH耐受范围广，可耐受0.5 M NaOH和0.5M HCl 处理，不降解，抗体结合能力不变。

2. Protein G

Protein G并不是我们熟知的G Protein（细胞表面G蛋白）， 而是G族链球菌的细胞表面蛋白，分子量25kDa，和IgG的Fc区域特异性结合，还能以低亲力与Fab区域特异性的结合，但不与IgA和IgM结合。相比于Protein A，Protein G可以更广泛、更强地、与更多类型的IgG结合，但是载量却较低，约20mg人IgG/ml。

Protein A和Protein G的多个结构域可与IgG结合

Protein A 和 Protein G对于不同物种和亚型的IgG的亲和力如下表；

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Affinity of Protein A/G for IgG Types from Different Species | NEB
Protein A与Protein G有何不同？如何选择？ - 知乎
如何选择一抗和二抗？ - 安必奇生物 (abace-biology.com)