一、大鼠固定
将大鼠固定好，将尾巴拉直，绷紧。在进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定，如尾静脉注射架或粗的矿泉水瓶。
二、酒精棉球擦拭尾巴，使血管扩张
三、用左手的中指和无名指将大鼠尾巴固定
注射时左手扯尾，使尾巴紧贴中指，中指垫高处为进针部位，一般选择距尾尖1/4或1/3处进针，此处皮肤较薄，血管清晰，进针容易。进针时针头与桌面平行，针尖稍稍朝下一旦进入，须将针头稍稍上挑进入，针头沿血管进入，肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进，可明显地感觉到针行通畅，毫无阻力。若针头不在血管中，手感针行有阻力，有一种堵的感觉。进针时不要太深，针头入皮肤后马上把针头略往上，平行进针，针扎入时有落空感，推液时无阻力则说明成功了！如针头处出现皮丘则说明在皮下，推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处，甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来，不要马上在最高处打。
四、通过看有无回血来测试针是否在静脉内
五、缓慢推针注射
六、结束注射时，用酒精棉球挤压伤口十秒钟，以便其伤口愈合
七、注意
1. 建议先用蓝墨水练手，因为新手往往看不出打入的是皮下还是静脉。
2. 动物越小越好操作，小鼠比大鼠容易，幼年大鼠比成年大鼠容易；对于小鼠最好还是尾静脉注射，这样损伤最小；成年大鼠实在不行可以选股静脉注射，相对要容易一些。
3. 针进入后，切记手不可发抖，因为血管壁非常薄，容易扎穿。推药时，要缓推。若进针成功，推药顺畅，无阻力；若推药时感觉有阻力，说明针头不在血管中，须及时拔出，重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。
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