单细胞测序技术是近年最大的生命科学突破之一,相关文章频繁发表于各大顶级期刊,然而单细胞数据的分析依然是大家普遍面临的障碍。本专题将针对10X Genomics单细胞转录组数据演示各种主流分析,包括基于Seurat的基础分析、以及基于clusterProfiler、Monocle、*SingleR等R包的延伸分析。不足之处请大家批评指正
硬件配置
10X Genomics单细胞数据分析对电脑硬件配置要求比较高。上游分析软件Cell Ranger最低配置要求8核CPU+64G内存,推荐配置为16核CPU+128G内存,这显然不是个人电脑可以胜任的。下游分析使用R语言Seurat包时,10000个细胞的表达矩阵,8G内存的电脑就不能应付了。因此没有服务器的同学不用考虑上游分析,仅做下游分析最低也要16G内存的电脑。
R语言的安装
R语言安装程序官方下载链接:https://cran.r-project.org/
windows版本选择红色箭头所示链接
图片点击后进入以下界面,继续点击红色箭头所指链接
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注意:不要安装最新的R语言4.0版本,很多包还不提供支持!!!
图片点击后进入以下界面,继续点击红色箭头所指3.6.3版本
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图片安装文件下载后就是常规的windows程序安装过程了
Rtools的安装
Rtools的相当于R在windows中使用的一个补丁,我只在安装R包的时候遇到过rtools报错,其它时候没感觉到它的存在。官方解释如下:
Rtools provides a toolchain for Windows platform that work well with R. It mainly includes GNU make, GNU gcc, and other utilities commonly used on UNIX-ish platform. R statistical language & environment is that it is open source and cross-platform.
Rtools下载地址:
https://cran.r-project.org/bin/windows/Rtools/history.html
图片下载箭头所示版本安装即可,注意以下安装界面:
图片红框标注的两个选项一定都要选择,第一个选项默认是没打钩的。
RStudio的安装
Rstudio的下载链接:https://rstudio.com/products/rstudio/download/
选择红色箭头所示链接
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图片安装文件下载后就是常规的windows程序安装过程了
Rstudio界面下安装分析所用的R包
使用代码安装R包****
打开RStudio,同时按住键盘上Ctrl+Shift+H三个键,切换到工作目录,逐行运行以下命令:
install.packages("devtools", dependencies=T)
运行library(Seurat) 后会提示(只有首次运行会提示)安装minconda和python,如下图所示:
图片输入y继续。安装过程中360安全卫士会提示病毒风险,选择信任即可。
至此,分析环境搭建完成!
原文在单细胞转录组基础分析一:分析环境搭建
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