Pull-down互作蛋白质谱鉴定

Pull-down技术可利用高度纯化且富集的诱饵蛋白捕获在细胞中相互作用较弱或丰度低的互作蛋白，大幅度提高发现新互作蛋白的效率。Pull-down互作蛋白质谱鉴定实验的具体步骤为：表达纯化GST、polyHis或Biotin标记的诱饵蛋白，使用固定化亲和配体将诱饵蛋白与固相基质稳定结合，再将诱饵蛋白与待测细胞裂解液进行混合孵育，在这一过程中，诱饵蛋白与互作蛋白相互作用并结合在一起，通过清洗除去非特异性结合的杂蛋白，即可获得与诱饵蛋白相互作用的目标蛋白，再通过质谱分析对目标蛋白进行鉴定。

Pull-down互作蛋白质谱鉴定流程（图片来源：百泰派克生物平台）  

在互作蛋白（IP-MS）的鉴定中，Co-IP可以证明两个蛋白在体内至少会形成复合物，但不能确定是否是直接相互作用的，同时，相互作用较弱的蛋白也不容易被鉴定到。这就需要借助于pull-down互作蛋白质谱鉴定技术，可以很好的克服IP-MS的缺点，鉴定到相互作用较弱或丰度低的互作蛋白，

百泰派克生物科技采用先进的UPLC-MS质谱平台，提供Pull-down互作蛋白质谱鉴定一站式服务。