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day20ChIP-seq比对bowtie2的使用

day20ChIP-seq比对bowtie2的使用

作者: meraner | 来源:发表于2022-06-03 15:26 被阅读0次

    前面几天ChIP-seq练习,主要针对我自己的cfDNA数据(双端)和下载的ChIP数据(单端)进行各种练习。后面继续应用这些数据。
    在脚本调试中,可以打开winscp来修改.sh文件,在xshell中运行,千万不要在xshell中用vim来修改。。。

    一、取sample名的一些脚本

    ls ~/ChIP-seqtest/rawdata/*.gz | while read id
    do
    file=$(basename $id) #basename是提取文件名,也就是把前面那些路径去掉
    sample=${file%%.*}  #%%这个符号是去掉后缀的意思。
    echo $file $sample
    done
    
    image.png

    这一串命令可以把文件的名称调取出来,还去掉了后缀,挺有趣。

    二、bowtie2索引的建立
    day12已经理论上详细学了bowtie2,可以自己构建索引。
    我通常只需要人和小鼠的,所以不用自己构建啦。
    下载之后上传。
    scp /Users/meraner/Downloads/mm10.zip zds209@222.28.163.113:~/database
    scp /Users/meraner/Downloads/hg19.zip zds209@222.28.163.113:~/database

    三、bowtie2 运行
    双端

    bowtie2_index=/data/zds209/database/hg19/hg19  #最后一个hg19是前缀的名称
    project=/data/zds209/ssresult
    ls $project/clean/*.gz | grep "_val_1" > tempgz1
    ls $project/clean/*.gz | grep "_val_2" > tempgz2
    paste tempgz1 tempgz2>tempconfig_file
    cat tempconfig_file | while read id
    do
    sample_dir="$project/clean"
    output_dir="$project/bam"
    arr=($id)
    fq1=${arr[0]}
    fq2=${arr[1]}
    file=$(basename $fq1)
    sample=${file%%_*} 
    bowtie2 -x $bowtie2_index -1 $fq1 -2 $fq2 | samtools sort -O bam -@ 5 -o - > $project/bam/$sample.bam
    done
    #sort:对bam文件进行排序(不能对sam文件进行排序)
    #-O:--output format (SAM, BAM)
    #-@:samtools中设置排序和压缩的线程数,默认单线程
    

    改了很多个错:1,index那个地方要注明前缀。2,那几个temp会在运行目录下生成几个文本文件,但之前如果有同名文件,就会报错。所以要把上一次运行的temp文件删除掉(rm temp)3,最后的bam文件要标注清楚输出路径。4,要提前试一下bowtie2 -helpsamtools命令的时候是不是能显示两个软件的基本信息。5,运行之后也会在e文件中提示:samtools: /usr/lib64/liblzma.so.5: no version information available (required by samtools),但是似乎不影响运行。
    数据终于运行了,看大神们的教程说似乎要运行很久的样子哈。2022.6.3端午快乐。

    单端

    bowtie2_index=/data/zds209/database/gh19
    ls /data/zds209/ssresult/clean/*.gz | while read id
    do
    file=$(basename $id) 
    sample=${file%%.*} 
    bowtie2 -p 5 -x $bowtie2_index -U $id | samtools -O bam-@ 5 -o  - > $sample.bam  #-U为单端数据
    

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