细胞核染料DPAI

DAPI 是啥

DAPI （4,6-diamidino2-phenyl-indole dihydrochloride），中文名称是4，6-联脒-2-苯基吲哚。(sigma, D9542)

DAPI染色原理：

        DAPI 是一种常用的DNA特异性染料，这种染料可以用汞弧灯或氩离子激光的紫外光来激发，发射出明亮的蓝色荧光。该染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区，结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm而散射峰是461nm，正好UV（紫外光）的激发波长正好是356nm，使得DAPI成为了一种常用的荧光检测信号。这种蓝色的荧光染料结合在双股DNA的小沟上,特别容易和AT碱基团相结合，其荧光寿命分布曾用于确定结合位点的不均匀性.DAPI与双股DNA结合时，其荧光强度增加20倍左右，这是由于DAPI和小沟处的水分子都被置换。DAPI与单股DNA结合时荧光强度一般不会增加。DAPI的荧光在它与葡聚糖磷酸盐、SDS、多磷酸盐其它多聚阴离子(Polyanion)相结合时也会增加。DAPI还可与肌质网,微管蛋白和微管相结合。DAPI有较强的消光系数,是荧光最强的DNA染料之一。

        虽然Hoechst染料荧光可能更强一些，但其光稳定性不如DAPI。DAPI在琼脂中检测双股DNA灵敏度要明显高于溴化乙锭(EB)，在RNA存在的条件下对DNA的选择性也高于EB等染料。现在DAPI常于作荧光染色的复染，标记出细胞核。快速简便成功率高，整个染色过程只需十分钟，而且DAPI极不易淬灭。

温馨提示：

DAPI强烈致癌，操作时要戴上手套。