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目的：验证造血干细胞的多向分化潜能。在文献中有用到。doi: 10.1186/s13287-018-0926-x
这些方法虽然均有其局限性而不能完全代表造血干细胞，但在造血干细胞的研究，尤其是人造血干细胞和早期祖细胞的研究中仍具有重要的意义。
目前用来检测造血干细胞和早期祖细胞的体外克隆实验包括长期培养启动细胞(LTC-IC)和延长的长期培养启动细胞(extended long-term culture initiating cell,ELTC-IC)测试、高增殖潜能集落形成细胞(high proliferative potential colony form-ing cell, HPP-CFC)测试、卵石样区域形成细胞(cobblestone area-forming cell,CAFC)测试、原始细胞集落(colony forming unit-blast, CFU-Blast)测试、CFU-A(colony forming unit type A)实验、混合集落(colony forming unit-mix,CFU-Mix 或
colony forming unit-granulocyte, erythrocyte, macrophage, megakaryocyte, CFU-GEMM)培养法及二次再克隆实验(secondary recloning assay)等。中科博生。
（1）长期培养启动细胞和延长的长期培养启动细胞测试
在受照射骨髓基质细胞的支持下生长35〜60d所产生的集落被称为长期培养启动细胞(LTC-IC),生长60〜100d的被称为延长的长期培养启动细胞(ELTC-IC) O LTC-IC是反映造血干细胞功能的指标，其原理主要是根据绝大多数祖细胞寿命有限，在长期培养体系中向终末细胞分化而失去集落形成能力，或出现凋亡现象，而具备自我更新能力的细胞则能维系其低分化特性因而长期存活。
（不管国内还是国外，“骨髓基质细胞”和“骨髓基质干细胞”是同一个概念，并且二者和“骨髓间充质干细胞”在大部分情况下不作明确区分，但是国内看到一种说法认为通过贴壁生长分离的细胞是骨髓基质（干）细胞，而通过percoll细胞分离介质离心分离出的细胞是骨髓间充质干细胞。
简而言之，大部分情况下三个概念并不加以区分，不过也少部分人认为其中一个（间充质干细胞）与另外两个有所不同。
作者：呱琦
链接：https://www.zhihu.com/question/67634325/answer/255071731
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迄今为止，ELTC-IC和LTC-IC代表了体外培养中最幼稚的造血细胞。它们从增殖分化到形成集落所需的时间比各种集落形成细胞(包括HPP-CFC、CFU-GEMM,CFU-GM.BFU-E.CFU-E等)要长得多，因而比它们更原始。将这种细胞种植到受照射骨髓基质上能维持数周或数月的造血。用5-FU处理的小鼠骨髓细胞，其中无CFU-S12,有在骨髓基质上启动长期造血的能力，而高度纯化的CFU-S12不能在基质上维持长期造血，这说明LTC-IC是比CFU-S12更早的干细胞。LTC-IC虽然不能代表真正的干细胞，但的确可反映干细胞的存在和变化，这已被大家公认。中科博生。
（2）高增殖潜能集落形成细胞测试
Bradley和Hodgson首先发现，骨1M细胞在多种造血因子存在时能在体外半固体培养10〜12d后形成大集落(直径＞0.5mm，约5X 104个细胞)。他们把骨髓中能形成这种大集落的细胞称为高増殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)。集落培养时间随种属不同而异，小甌为14d,人为21~28d。中科博生。
HPP-CFC具有如下特点：
①在体内对细胞毒药物5-FU不敏感；
②具有向髄系和淋巴系分化的潜能；
③对多种细胞因子(如GM-CSF, CSF-1、IL-1, IL-3、IL-4, IL-6)有反应性；
④同受致死剂量射线照射小鼠造血的重建密切相关。中科博生。
目前HPP-CFC被分成HPP-CFC-1 x HPP-CFC-2、HPP-CFC-3三群。HPP-CFC-1是高度静息的细胞群，与pre-CFU-S密切相关，通常认为比CFU-A更早，但比LTRC更成熟，相当于第28天的CAFC和MRAo HPP-CFC-2与定向祖细胞更接近，HPP-CFC-3则更成熟。人骨髄晚期HPP-CFC形成宣径约0.5 —1mm的集落，早期HPP-CFC形成直径约1~2mm的集落，有的可达2.5〜5mm。中科博生。
（3）卵石样区域形成细胞测试
CAFC是一种基于Dexter体系的微型基质依赖骨髓培养法，它是将骨髓细胞接种于受致死剂量射线照射的基质细胞层上培养10〜28d,观察卵石样血岛形成情况。CAFC在分化程度上同 MRA 和CFC-Blast及原始 HPP-CFC相当，比LTRC成熟。中科博生。
（4）原始细胞集落实验
CFU-Blast是早期的造血细胞(CFC-Blast)在体外适当的条件下半固体培养18〜32d后，形成的由形态上未分化的细胞组成的小集落(＞25个细胞)。这种形态上未分化的细胞具有高度再克隆能力和自我更新潜能，并有产生多系定向祖细胞的能力，在分化程度上相当于HPP-CFC或更早。中科博生。
（5）CFU-A 实验
这是在体外用半固体培养法检测小鼠骨髓造血干细胞的方法。小鼠骨髓细胞在L929和AF1-19T条件培养液刺激下，在体外培养lid可形成直径＞2mm的集落。人骨髓细胞在CSF-1和GM-CSF存在下培养23d后形成直径＞imm的CFU-AO CFU-A为不均一的细胞群体，在分化程度上，CFU-A比LTRC和HPP-CFC更成熟，较早期的CFU-A相当于HPP-CFC-1。中科博生。
（6）体外混合集落培养
CFU-Mix是半固体培养12〜16d后形成的含有粒细胞、红细胞、巨噬细胞和巨核多系血细胞的集落。这些细胞大致相当于较晚期的CFU-S,比LTRC成熟。中科博生。
（7）二次再克隆实验
将造血干细胞先在适宜的条件下进行培养后再检测这些培养后的细胞是否具有集落形成能力。利用该实验通常可以观察造血干细胞的自我复制能力及向祖细胞分化的能力。中科博生。
虽然各种体外实验可以部分反映造血干细胞的情况，但值得注意的是，当前的各种体外检测方法均无法观察造血干细胞向淋巴系的分化，即无法判断这些细胞是否具有全系造血能力，因此，迄今为止仍没有一个体外培养方法可用于检测造血干细胞
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