冰冻切片

1. 准备试剂和耗材

包埋剂；镊子，包埋盒，干冰，液氮

2.操作步骤

2.1 速冻：干冰异戊烷体系/液氮

在异戊烷中加入干冰，形成冷的体系，我问了我们常用试剂商，他那里没有异戊烷，所以采用液氮速冻体系

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2.2 组织前处理

把剥离下来的新鲜组织，用吸水纸吸干水

此步骤一定要吸干水分，如有液体残留，OCT包埋后，组织表面形成冰晶，影响切片效果

空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南

2.3 组织包埋

可以在包埋盒上做上标记（比如组织来源，方向），平铺一层包埋剂，均匀覆盖在整个底部，按照一定方向把组织把组织放进包埋盒中，再继续加入包埋剂填满整个包埋盒。

一定不能有起泡，如果有起泡，可以用注射器针头挑破

2.4 速冻

把包埋盒放进液氮中速冻20-30s，取出后放到-80℃冰箱保存。

空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南

高冷冻切片的技术水平

液氮异戊烷冷冻OCT包埋法

（20221026）