一、在任意文件夹下面创建形如 1/2/3/4/5/6/7/8/9 格式的文件夹系列。
mkdir -p 1/2/3/4/5/6/7/8/9/
二、在创建好的文件夹下面,比如我的是 /Users/jimmy/tmp/1/2/3/4/5/6/7/8/9 ,里面创建文本文件 me.txt
cd 1/2/3/4/5/6/7/8/9/
touch me.txt
三、在文本文件 me.txt 里面输入内容:
Go to: http://www.biotrainee.com/
I love bioinfomatics.
And you ?
sudo apt-get install vim-gtk
#之前出现了一个问题,用vim编辑器的时候上下左右键打出来是ABCD,查了一下是Ubuntu自带vi不完整,手动安装完整vi
vi me.txt
#进入编辑器后按i开始编辑,按esc完成,再退出编辑器
#:q!强制退出并不保存修改
#:wq保存修改并退出
四、删除上面创建的文件夹 1/2/3/4/5/6/7/8/9 及文本文件 me.txt
rm -rf 1
#直接跳到1所在目录,删除目录1,1及其子目录和子目录中的文件全部删除
五、在任意文件夹下面创建 folder 1~5这5个文件夹,然后每个文件夹下面继续创建 folder 1~5这5个文件夹
sudo apt-get install tree
#安装树型结构展示
mkdir folder{1..5}/folder{1..5}
六、在第五题创建的每一个文件夹下面都 创建第二题文本文件 me.txt ,内容也要一样。
touch me.txt
#先创建一个文件
echo folder{1..5}/folder{1..5} | xargs -n 1 cp -v me.txt
七,再次删除掉前面几个步骤建立的文件夹及文件
rm -rf folder*
八、下载 http://www.biotrainee.com/jmzeng/igv/test.bed 文件,后在里面选择含有 H3K4me3 的那一行是第几行,该文件总共有几行。
wget http://www.biotrainee.com/jmzeng/igv/test.bed
cat test.bed | grep -n H3K4me3
#第几行
cat test.bed |wc
#共几行
九、下载 http://www.biotrainee.com/jmzeng/rmDuplicate.zip 文件,并且解压,查看里面的文件夹结构
wget http://www.biotrainee.com/jmzeng/rmDuplicate.zip
unzip rmDuplicate.zip
tree -a
十、打开第九题解压的文件,进入 rmDuplicate/samtools/single 文件夹里面,查看后缀为 .sam 的文件,搞清楚 生物信息学里面的 SAM/BAM 定义是什么。
cd rmDuplicate/samtools/single/
cat tmp.sam
less -SN tmp.sam
参考资料1
参考资料2
参考资料3
参考资料4
参考资料5
十一、安装 samtools 软件
mkdir biosoft
cd biosoft/
mkdir samtools
cd samtools/
#创建目录
wget https://github.com/samtools/samtools/releases/download/1.11/samtools-1.11.tar.bz2
tar -xjf samtools-1.11.tar.bz2
#下载并解压
cd samtools-1.11/
./configure --prefix=/home/zhangliyin/practice/biosoft/samtools/samtools-1.11
#configure: error: no acceptable C compiler found in $PATH
sudo apt-get install -y build-essential
#安装C编译环境
#这里暂时先装在opt/下,到底装哪里要再看看,反正是练手随便装一下
./configure --prefix=/home/zhangliyin/practice/biosoft/samtools/samtools-1.11
#再来一次
#有一系列报错,根据报错下载就行,ubuntu和centos指令有细微差别,我用的Ubuntu
sudo apt-get install bzip2-devel
sudo apt-get install ncurses-dev
sudo apt-get install zlib1g-dev
sudo apt-get install libbz2-dev
sudo apt-get install liblzma-dev
#完成
make
make install
调用samtools的帮助功能
./samtools --help
把它加入环境变量,之后就可以不需要加绝对路径就可以直接调用
echo 'export PATH="/home/zhangliyin/practice/biosoft/samtools/samtools-1.11/bin:$PATH" ' >>~/.bashrc
source ~/.bashrc
十二、打开 后缀为 BAM 的文件,找到产生该文件的命令。 提示一下命令是:
/home/jianmingzeng/biosoft/bowtie/bowtie2-2.2.9/bowtie2-align-s --wrapper basic-0 -p 20 -x /home/jianmingzeng/reference/index/bowtie/hg38 -S /home/jianmingzeng/data/public/allMouse/alignment/WT_rep2_Input.sam -U /tmp/41440.unp
samtools view -h tmp.rmdup.bam | grep bowtie
#或者
samtools view -h tmp.sorted.bam |grep '^@PG'|awk 'BEGIN{FS="\t"}{print $5}'|cut -d: -f2
十三题、根据上面的命令,找到我使用的参考基因组 /home/jianmingzeng/reference/index/bowtie/hg38 具体有多少条染色体。
samtools view -h tmp.rmdup.bam | grep -v ^@ | cut -f 3 | uniq -c
#或者
samtools view -H tmp.rmdup.bam | head -n 20
#或者
samtools view -H tmp.rmdup.bam | awk '{print $2}' | sort |uniq -c| grep -v '_'
十四题、上面的后缀为 BAM 的文件的第二列,只有 0 和 16 两个数字,用 cut/sort/uniq等命令统计它们的个数。
十五题、重新打开 rmDuplicate/samtools/paired 文件夹下面的后缀为 BAM 的文件,再次查看第二列,并且统计
samtools view tmp.sorted.bam | cut -f 2 | sort | uniq -c
samtools view tmp.rmdup.bam | cut -f2 | sort | uniq -c | sort -t' ' -nrk1,1
#输出有差别
十六题、下载 http://www.biotrainee.com/jmzeng/sickle/sickle-results.zip 文件,并且解压,查看里面的文件夹结构, 这个文件有2.3M,注意留心下载时间及下载速度。
wget http://www.biotrainee.com/jmzeng/sickle/sickle-results.zip
unzip sickle-results.zip
cd sickle-results/
tree -a
十七题、解压 sickle-results/single_tmp_fastqc.zip 文件,并且进入解压后的文件夹,找到 fastqc_data.txt 文件,并且搜索该文本文件以 >>开头的有多少行?
unzip single_tmp_fastqc.zip
cd single_tmp_fastqc/
grep -c ">>" fastqc_data.txt
十八题、下载 http://www.biotrainee.com/jmzeng/tmp/hg38.tss 文件,去NCBI找到 TP53/BRCA1等自己感兴趣的基因对应的 refseq数据库 ID,然后找到它们的 hg38.tss 文件的哪一行。
wget http://www.biotrainee.com/jmzeng/tmp/hg38.tss
cat hg38.tss | grep NM_000546
cat hg38.tss | grep -n NM_000546
#TP53
grep 'NM_007294' hg38.tss
grep -rn "NM_007294" hg38.tss
#BRCA1
十九题、解析 hg38.tss 文件,统计每条染色体的基因个数。
cat hg38.tss |cut -f 2 | sort | uniq -c
grep -oE 'chr[0-9]{1,2} | chr[a-zA-Z] {1,2}' hg38.tss | sort | uniq -c
cat hg38.tss | awk '{print $2}' | sort | uniq -c | grep -v '_'
#去碎片基因
二十题、解析 hg38.tss 文件,统计 NM和 NR开头的熟练,了解 NM和 NR开头的含义。
cat hg38.tss | cut -d "_" -f 1 | sort | uniq -c
# 51064 NM
#15954 NR
cat hg38.tss | awk '{print $1}'| cut -c 1-2 | sort | uniq -c
# 51064 NM
# 15954 NR
grep -E '^(NM|NR)' hg38.tss | wc - l
#67018
#NM:转录组产物的序列mRNA
#NR:非编码的转录组序列ncRNA
网友评论