HiCUP使用以及结果

作者: 可能性之兽 | 来源:发表于2022-12-30 19:10 被阅读0次

HiCUP使用以及结果
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365篇了，刚好凑齐一年之数。。话说我这个IP属地怎么变来变去的。。

HiCUP是一个处理由Hi-C和捕获Hi-C（Capture Hi-C，CHi-C）产生的测序数据的流程，它们是用于研究三维基因组组织的技术。流程比对数据到一个指定参考基因组，并去除可能阻碍随后分析的假象。HiCUP也产生一个易于解释，但详细的质控（quality control，QC）报告。

image.png

HiCUP由6个Perl脚本组成，分别如下：

(1) HiCUP Digester：确定reference上的酶切位点
(2) HiCUP：为主程序，依次执行以下步骤
(3) HiCUP Truncater：在reads上寻找酶切位点，并将reads切开
(4) HiCUP Mapper：将reads比对到参考基因组上，如果输入的是PEreads，则R1和R2分开单独比对到reference上。比对内部调用bowtie或bowtie2比对。这一步会利用到事先建好的bowtie2 index
(5) HiCUP Filter：结合HiCUP Digester生成的酶切位点文件，过滤掉常见的Hi-C artefacts，例如Dangling Ends等
(6) HiCUP Deduplicator：移除(仅保留一处最佳比对) PCR重复

HiCUP的使用

HiCUP 0.8.0

mamba install -y hicup

需要下载bowtie index和fasta文件



先采用bowtie2-build对reference建立索引

bowtie-build 1.fa,2.fa,...,MT.fa Human_GRCh37
bowtie2-build 1.fa,2.fa,...,MT.fa Human_GRCh37

采用hicup目录下的hicup_digester在reference上寻找酶切位点，生成酶切信息文件



hicup_digester --genome Human_GRCh37 --re1 A^AGCTT,HindIII *.fa

配置好后再采用hicup进行分析

有两种方式运行hicup，其一是将所有参数写到config文件中，可以先运行

hicup --example
## 修改后的配置改为hicup_run1.conf
hicup --config hicup_run1.conf

生成样例config文件，修改其中的参数，并运行

或者直接用命令行运行，如下：

hicup  --bowtie2 /path/to/bowtie2  --digest Digest_reference_HindIII_None_-2022.txt  --format Sanger  --index /path/to/reference/index   --keep --outdir /path/to/output/dir   --threads 40 /path/to/reads*.fastq.gz