50%的分子机制研究中会涉及转录因子的调控,转录因子结合到靶基因的启动子区域调控基因的表达,是基因表达量改变最重要的调控方式。我们在研究circRNA, lncRNA, miRNA, m6A, mRNA等任何调控类分子时,其最终靶标都会选择mRNA。那么最佳的mRNA靶基因便是转录因子,我们希望预测circRNA等调控的转录因子,转录因子调控的靶基因。
预测转录因子靶标的方法无非以下三种:
1. 通过motif预测的,比如JASPAR网站,这种分析是基于motif预测,基于序列的特征预测,这只能说明,序列上可以结合,但并不意味着,实验情况下的组织或者细胞正在发生这样的结合过程。
2. 第二大类预测是基于chipseq的数据,比GTRD数据库
http://gtrd.biouml.org/,转录因子靶基因互相预测全网最全,没有之一对每一个转录因子捕获他们结合的DNA序列进行测序,定位,找到潜在的结合靶标, 这个方法的确可以找到实时结合的,可是,通常只对实验组进行chipseq,对照组是不是也结合呢?如果实验组、对照组同时结合,我们不认为这样的关系影响着细胞/组织疾病状态改变。
3. 第三种找靶标的方法是对转录因子进行过表达敲低,做RNAseq,可以找到差异表达的基因,这些基因我们可以认为是其潜在靶标,可问题是,差异基因可能是其直接间接靶标,毕竟基因上下游关系千丝万缕,不是线性的。
那么有没有一个比较好的方案可以解决呢,我们在前段时间讨论找某个分子的靶标时,研读了大量文献,结合我们项目经验发现,结合chipseq数据及RNAseq数据可以比较好的确定靶标。B站视频链接:https://www.bilibili.com/video/BV1iA411H7RU
那么这些数据从哪里找呢?
本期我们讨论转录因子找靶标,结合chipseq分析及RNAseq分析。
以下是视频录屏链接,有需要的老师可以观看。
B站 超清链接 :
上:https://www.bilibili.com/video/BV1Ph411Q7X9
下:https://www.bilibili.com/video/BV1KV411v74p
主要讨论内容:
网友评论