磁珠预处理和实验方法 - MedChemExpress

                                                                         磁珠的优势

◎ 蛋白荷载量高

◎ 特异性强、非特异性结合性低

◎ 样品损失小

◎ 操作方便

                                                                          如何操作

■磁珠预处理

将磁珠充分混悬，取 25-50 μL 磁珠，置于 1.5 mL EP 管中，加入 400 μL 结合/洗涤缓冲液，充分混悬，置于磁力架，磁性分离，弃上清；重复以上洗涤步骤 2 次。

■实验方法

Step 1. 裂解细胞并准备用于免疫沉淀的样品。

Step 2. 预处理样品：通过将裂解样品单独与珠子或与无关抗体结合，以除去能与 IP 组分非特异性结合的任何蛋白质。

Step 3. 使用针对目的蛋白的抗体孵育溶液，用直接法或用间接法将抗体固定在磁珠上。继续孵育，以形成抗体-目的蛋白复合物。

Step 4. 沉淀微珠-抗体-目的蛋白复合物，去除上清液。

A/G 磁珠的 IP 实验

Step 5. 洗涤沉淀的复合物数次。使用磁珠时，每次洗涤置于磁性分离架上即可除去上清液。最后一次洗涤后，需要除去尽可能多的上清液。

Step 6. 使用低 pH 或 SDS 样品上样缓冲液从磁珠上洗脱蛋白质。

Step 7. 分析目的蛋白或蛋白复合物：十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)，染色，质谱，Western Blotting 等。

注：具体操作细节，还需仔细阅读对应产品说明书

■ MCE 多功能磁力架——磁珠完美搭档

MCE 磁力架产品是磁珠专用配套设备，支持 MCE 全线磁珠类产品：

◎优雅外观

◎强磁磁芯

◎优化设计：“三明治”孔板

◎兼容

性：200 μL-2 mL-15 mL

■客户验证

HY-K0201 Anti-HA Magnetic beads HY-K0208 Streptavidin Magnetic Beads