2022-09-10 磁珠分离T细胞的方法

CD3 T 细胞 磁珠分离T细胞的方法

书接上文（PBMC分离）以CD3T细胞为例

实验试剂：

1. 美天旎的CD3beads（130-050-101）为例
2. Buffer：

实验步骤：

2 磁珠孵育

1. 细胞计数
2. 淋巴细胞离心，300g×10min，去除上清
3. 每10的7次方细胞，用80 uL buffer重悬
4. 每10的7次方细胞，用20ul CD3磁珠混匀。
5. 重悬混匀后，4℃冰箱避光孵育15min（如果是冰上，需要增加孵育时间；如果是常温，会增加非特异结合）
6. 每10的7次方，加入1 mL Buffer洗涤，300g 离心 10min，弃上清
7. 用500ul Buffer重悬细胞

3. 磁珠分选

LS （分选细胞多）

MS（分选细胞少）

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1. 将分离柱放置磁铁中央
2. 将分离柱中加入3mL buffer，充分湿润分离柱
3. 将细胞悬液加到分离柱中
4. 结合磁珠的细胞会被吸附到分离柱上，没有结合的细胞会顺着液体留下来。加入3mL的buffer，待液体全部流尽，再加入3mL，一共洗3次。
5. 将分离柱从磁铁上拿下

6. 加5mL的buffer加到分离柱中，迅速用塞子推下，留下的液体中含有目的细胞

   
   image.png

参考资料

美天旎cd3磁珠说明书