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科研汪的日常 48 伊文思蓝测血脑屏障通透性

科研汪的日常 48 伊文思蓝测血脑屏障通透性

作者: 007木子 | 来源:发表于2022-08-28 23:51 被阅读0次

    伊文思蓝是一种常用的偶氮染料制剂,由于其在血液中与血浆白蛋白有很高的亲和力,因此常被用于示踪观察血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)的完整性,或用于测定血容量。

    科研汪最近用到的是用伊文思蓝测血脑屏障通透性。正常状态下血浆白蛋白无法透过血脑屏障,与血浆白蛋白结合的依文思蓝无法使神经系统着色,若血脑屏障被破坏,依文思蓝就可以使其着色。随后通过化学透析法或比色法,检测伊文思蓝在组织中含量的高低,进而判断血脑屏障的完整性。

    实验准备及主要步骤:

    [if !supportLists]1. [endif]各组动物腹腔注射0.2ml(2% EB溶液)

    [if !supportLists]2. [endif]1%戊巴比妥钠30-40 mg / kg 麻醉后打开胸腔,心内灌注PBS溶液20-30ml(当右心房流出液体变清澈时即可),断头后取脑组织切片(1-2mm),并观察EB染色情况。

    [if !supportLists]3. [endif]脑组织称重,每100mg组织加入,500ul PBS进行研磨,随后加入等体积甲酰胺,55℃孵育24h。

    [if !supportLists]4. [endif]1000 r/ min 离心5min取上清液,用分光光度计检测波长为620 nm 的吸光度。

    参考链接:

    1.伊文思蓝:

    https://baike.baidu.com/item/%E4%BC%8A%E6%96%87%E6%80%9D%E8%93%9D/1165650?fr=aladdin

    2.血-脑屏障:

    https://baike.baidu.com/item/%E8%A1%80-%E8%84%91%E5%B1%8F%E9%9A%9C/1190890?fr=aladdin

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