植物激素乙烯在植物的生长发育发挥作用，但是目前用于乙烯处理的主要是由ACS合成酶合成的乙烯前体ACC处理，这篇文章发现ACC能够不依赖乙烯信号在生殖过程中起作用。
在先前的研究过程在acs六突的背景下沉默掉ACS8 ACS11 拿到了acs8突，出现了乙烯信号不敏感的表型，除此之外，还出现种子结实率下降的表型，那么ACS会在植物的生殖里面起作用吗？首先他们观察了acs突变体以及乙烯信号转导途径ein2，etr1突变体，发现acs8突育性下降，并且仔细观察其含有未受精的胚珠。暗示着受精缺陷是发生受精之前。如果外源共表达ACS8/11并且含有非RNAi靶标的点突的话，可以看到能部分恢复的表型，暗示这表型的确是由于缺失ACS8/11造成的。
acs表型
ACS8/11回补
通过正反交发现，育性下降主要是雌方的原因。进一步利用半合子的材料，正反交发现后代雌雄双方均为1:1,但是F1代雌方做母本的材料后代减少，说明造成的原因是雌方的孢子体引起的。
正反交
正反交
进一步探究引起缺陷的原因，LAT52:GUS做父本进行杂交，野生型母本能够正常导向，但是acs8突导向异常，苯胺蓝染色也是同样的结果，暗示着acs影响了花粉管导向的问题。进一步为了说明这个结果，进行半体外花粉管导向，可以发现花粉管导向acs8突的胚珠更加少，但是如果施加ACC的话，导向突变体的比例恢复正常，但是乙烯的话则是不能恢复，说明ACC的确是影响了花粉管导向的过程，并且ACC可能作为一个吸引物质，而非乙烯。
GUS或者苯胺蓝染色
半体外花粉管导向
在此之前AtLURE1s已经被证明能够作为花粉管的吸引物质，作者想查看ACS与AtLURE1关系，首先发现在acs突变体中，AtLURE1的转录水平未发生明显变化，但是蛋白定位在丝状器的比例大大减少，基本主要在助细胞中检测到，并且外源施加ACS能够恢复AtLURE1.2-GFP的正常定位。并且在ein2突变体背景下+ACC也能恢复AtLURE1.2的分泌，说明ACS影响了AtLURE1s助细胞到丝状器的分泌，且此过程不依赖于乙烯信号途径。
AtLURE1s 和 ACS
AtLURE1s 和 ACS
并且ACS8主要在胚珠的孢子体组织中，这与前面的正反交结果相一致。
proACS8:GUS
在先前的研究中，发现ACC能够作为GLR的激动剂，于是他们利用野生型和glr3.1 glr3.2 glr3.3 glr3.6 四突材料的根表皮做原生质体做膜片钳，发现相比于野生型外源施加ACC引起的电流激活，glr四突中几乎没有。而glr3.1 glr3.2双突变体对ACC仍有应答，而glr3.3和glr3.6单、双突变体对ACC无应答，说明主要是GLR3.3和GLR3.6参与对ACC的响应。由于被子植物中的GLR含有20多个，因此筛选配体不是很方便，于是作者挑选了在苔藓中仅有一个的PpGLR1,外源转入卵细胞细胞，发现ACC能够强烈的激活下游Ca的响应。
ACC在原生质体和卵母细胞作用于GLR
那么ACC是否能够诱导胚珠中钙离子的增加呢？于是作者在ein2-5突变体中表达了钙离子的sensor GCaMP3，可以看到外源施加ACC能够诱导钙的spike产生，这种信号主要产生在孢子体区域，然后蔓延到开来。并且外源施加GLR抑制剂能够抑制电流的活性。有趣的是，如果在acs8突背景下加Ca离子诱导剂能够A23187恢复AtLURE1.2-GFP停在助细胞的表型。因此Ca离子是ACC和AtLURE1s的中间信号。
ACC刺激胚珠中cnqx依赖性Ca2+的升高
综上这篇文章发现了ACC区别于乙烯信号的新功能，其能够直接作用GLR，引发Ca离子的振荡，随后影响到AtLURE1s的分泌过程，从而影响花粉管的导向。但是目前ACC是如何从孢子体组织影响到配子体组织还不清楚，有可能是形成电势梯度。
文章中好几处地方是值得我去学习的，例如AtLURE1.2-GFP的观察相当仔细，并且在ACC诱导胚珠钙spike的时候用了ein2-5的突变体，这样避免了乙烯信号转导的影响。不过对于ACC是否影响了其他花粉管的吸引物质例如XIUQIUs，TICKETs仍拭目以待。
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