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Western Blot半干转

Western Blot半干转

作者: JohnSongJi | 来源:发表于2018-12-02 13:17 被阅读0次
  1. 半干转液

Abcam公司 General western blot protocol 推荐使用0.04%SDS半干转液。

成分 浓度 整理后浓度
Trisbase 48mM 5.8g/L
Glycine 39mM 2.9g/L
Methanol 20% 200ml/L
SDS 0.04% 0.4g/L

小分子量蛋白如内参β-actin使用无SDS的即可,加SDS容易转过。
大分子量可将SDS浓度调至0.1%

  1. 半干转条件
    半干转条件
    表面积根据阳极滤纸面积计算得来,与滤纸上的胶数量无关。
    使用恒流模式半干转。
电流密度 时间
0.8 mA/cm2 1-2h
1.2 mA/cm2 1h
2.5 mA/cm2 30-45min
4.0 mA/cm2 10-30min

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