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Tandem Mass Tags串联质谱标签TMT定量蛋白分析

Tandem Mass Tags串联质谱标签TMT定量蛋白分析

作者: c674838bdc26 | 来源:发表于2020-04-27 10:00 被阅读0次

    串联质谱标签Tandem Mass Tags(TMT)定量蛋白分析系统可以在一次实验中对多个样品进行全蛋白质组定量分析,由于其通量高、准确度高、对低丰度蛋白的鉴定效率高,是多样品定量分析很好的选择。

    串联质谱标签TMT标记试剂由氨基反应基团,质量平衡基团,以及报告离子基团组成。每个TMT标签的氨基反应基团的结构式和质量相同,但5个稳定重同位素在不同串联质谱标签TMT标签的报告离子基团和质量平衡基团之间的分布不同。不同来源的肽段被不同串联质谱标签TMT标签标记后,由于分子量完全相同,在质谱一级谱图上有相同的质荷比。经过高能碰撞解离,这些肽段在随后的二级谱图或者三级谱图上产生质量不同的报告离子。通过对这些报告离子的定量分析,实现了对不同样品的准确定量。经过多年的发展,串联质谱标签TMT标记试剂从最初的6通道已发展到16通道,可以同时最多检测16个样品。

    串联质谱标签TMT标记定量流程如下:

    [if !supportLists](1) [endif]首先使用胰酶对蛋白进行酶解消化,之后使用TMTpro 16标试剂盒对肽段进行标记。

    [if !supportLists](2) [endif]标记后的样品混合在一起,使用高pH分级离心小柱实现简便、快速地TMT样品分级,避免了传统分级需要单独一台液相色谱的高成本和繁琐流程。

    [if !supportLists](3) [endif]Orbitrap Fusio Lumos质谱平台结合Nano-LC,与传统的Q Exactive质谱相比,灵敏度和分辨率更高,实现准确、灵敏的蛋白定量。

    [if !supportLists](4) [endif]Proteome Discoverer软件是解析大规模TMT数据最强大的工具,可以对原始质谱数据进行数据库比对。发布的2.1版本加入诸多TMT定量新功能,可实现生物重复间定量比例的整合和相对标准偏差(RSD)的统计。

    百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusio Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出基于TMT的定量蛋白组分析服务技术包裹,欢迎咨询。

    TMT/iTRAQ蛋白组学_MultiNotch蛋白组学_百泰派克生物

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