上一章学习了无菌技术,它包括了整个实验流程所涉及到的各项技术,这一章我们就来学习一下无菌操作技术中的接种技术
什么是接种技术?就是把带有菌种的培养物转接到新的培养基上,让它生殖分化出新鲜菌落,新的菌落可以用来做微生物的各种实验;又或者是把它接种到新的培养基上保存;这些过程都称为接种技术
接种一般会用到接种针,接种环,无菌吸管和无菌注射器,无菌吸管和无菌注射器用在液体接种中
一:穿刺接种
接种针用在穿刺接种,把针垂直插入培养基底部,然后原路返回,针在培养基里不可左右移动,培养基是高层斜面或半固体培养基,什么是半固体培养基?就是在液体中加入琼脂培养基。接种环在接种时需要先内焰后外焰灼烧灭菌
穿刺接种的目的?为了检验菌种动力,检验菌种动力为什么需要把菌种接到培养基底部?因为当菌种长出了鞭毛后就可以移动,它会穿出培养基底部向外生长,半固体培养基也可以用来保存菌种
二:斜面接种
把接种环灼烧灭菌冷却后,挑取可疑菌落先自下而上画一条直线,然后再画蜿蜒的曲线,画曲线是增加菌种与培养基的接触面积,这种画法是为了让菌种分布更加均匀,因为当画曲线时必定会经过中间那条直线,就会把直线上的菌种均匀的分布在培养基上。具体操作步骤是左手试管,右手接种环,试管口朝向45°面向酒精灯,然后用右手的无名指和小指打开瓶塞
三:液体培养基接种
液体培养基接种时,用接种环挑取可疑菌落在试管与液体的交界面处的试管壁上接种,盖上试管帽后轻轻的旋转试管,使菌种充分溶解在液体中
四:培养基分装方法
平皿接种法下一节再讲。配制灭菌后需要等它冷却至50℃左右再倒平皿,左手拿平皿打开皿盖45°,盖口朝向酒精灯外焰,右手拿培养基缓慢倾倒,直到培养基逐渐铺满整个皿底,然后放在37℃的培养箱中烘干水分再用
好了总结一下这一节的内容,接种技术包括了液体,固体和半固体的接种方法,固体主要是斜面和穿刺接种,根据接种目的不同选择不同的接种方式
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