记录2

产物纯化操作步骤:

提示:第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

1.每 100μlPCR 扩增后体系或者酶切后体系加入 500μl 结合液 BB，充分混匀。(如果初始体系小于 100ul，请事先用双蒸水调整至 100μl)。

2.将上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中(吸附柱放入收集管中)，室温放置 1min，12,000rpm 离心 30-60sec，倒掉收集管中的废液。

3.加入 500μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!)，12,000rpm 离心30sec，弃掉废液。

4.重复操作步骤 3。

5.将吸附柱 EC 放回空收集管中，12,000rpm 离心 2min，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

6.取出吸附柱 EC，放入一个干净的离心管中，室温放置数分钟。

7.在吸附膜的中间部位滴加洗脱缓冲液 EB 80微升(洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中加

热效果更好)，室温放置 2min，12,000rpm 离心 1min。如果需要较多量DNA，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，离心 1min。(注意:洗脱体积越大，洗脱效率越高。

如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于30μl，体积过小降 DNA 洗脱效率，减少产量。)