【AbMole科研快报】栉孔扇贝多糖的理化特性及巨噬细胞免疫刺激

AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：栉孔扇贝多糖的理化特性及巨噬细胞免疫刺激活性

为了了解栉孔扇贝多糖结构与活性的关系、以及其免疫刺激效果，本研究中采用了两种由栉孔扇贝提取的多糖（CFP-1与CFP-2）。这两种物质通过热水提取、由柱层析法分离。分离出的CFP首先进行化学分析，以确定其物理化学性质。此后，将其与巨噬细胞RAW264.7共培养，以评价其免疫刺激活性。尽管由理化分析结果可知CFP-1与CFP-2这两种物质均由葡萄糖组成，缺乏三维螺旋结构；这两种多糖结构在分子量、糖醛酸含量（GAc）、分支度（BD）上均存在明显差距。体外实验中以巨噬细胞RAW264.7为模型测定其免疫刺激活性，发现分子量较大的CFP-2，GAc、BD更高，能够显著促进吞噬作用，激活iNOS、IL-6、TNF-ɑ与IL-1β基因，从而提高NO、IL-6、TNF-ɑ与IL-1β的分泌。因此，CFP-2显示其在功能性食品和营养学领域的巨大潜力，能够提高免疫刺激。相比之下，CFP-1，分子量较小，GAc、BD更高，其免疫刺激活性较差。

TAK-242 (Abmole, M4838，纯度 ＞98%) ，是TLR4信号通路抑制剂，能通过结合TLR4胞内区域抑制脂多糖诱导的炎症介质的产生。SP600125 (Abmole, M2076，纯度99.13%) 是一种广谱JNK抑制剂，作用于JNK1， JNK2和JNK3时，IC50分别为40 nM， 40 nM和90 nM，比作用于MKK4选择性高10倍，比作用于MKK3， MKK6， PKB，和PKCα选择性高25倍，比作用于ERK2， p38， Chk1， EGFR等选择性高100倍。U0126 (Abmole, M1977，纯度99.56%) 是一种高度选择性的MEK1/2抑制剂，IC50为0.07 μM/0.06 μM，作用于N3-S218E/S222D MEK比PD098059亲和力强100倍。SB203580 (Abmole, M1781，纯度100.0%) 是一种p38 MAPK抑制剂，IC50为0.3-0.5 μM，与SAPK3(106T)和SAPK4(106T)相比选择性低10倍，且抑制PKB磷酸化，IC50为3-5 μM。

作者在考察CFP激活RAW264.7细胞时，采用了不同的抑制剂如TAK-242、SP600125、SB203580、U0126，考察了其对TNF-ɑ水平的条件。上述抑制剂均购自于Abmole，在系列研究中起到了重要作用。

鸣谢：Shi F , Liu Z , Liu Y , et al. Comparison of PhysicochemicalCharacteristics and Macrophage Immunostimulatory Activities of Polysaccharidesfrom Chlamys farreri[J]. Marine Drugs, 2020, 18(8):429.