一般来说,方波脉冲的理论起始条件可通过指数衰减参数来确定,即在保持电容不变的情况下,将脉冲长度减半,电压增加约10%。之后的优化可在理论计算的脉冲电压附近以10 V为梯度增减。如果不知道指数衰减脉冲条件,可通过测试电压、电容和脉冲长度范围找到最佳的方波脉冲条件。当使用0.4cm电转杯时,大多数细胞类型的一般方波脉冲条件都在200-300V的电压范围和800-1000μF的电容范围内。对于0.2 cm的电转杯,其范围分别为80-160 V和800-1000μF。脉冲长度从10-20毫秒不等。
对于Entranster-E电转染试剂,当使用0.4cm电转杯时,大多数细胞类型的指数衰减脉冲条件在200-300V的电压范围和800-1000μF的电容范围内。对于0.2 cm电转杯时,其范围分别为80-160 V和800-1000μF。对于使用0.4 cm电转杯的电穿孔实验,测试电压范围为200–300 V,电容范围为800-1000μF。首先,将电压常数保持在220 V,从750μF开始,以100μF的增量改变电容。随后,从200 V开始,以10 V的梯度改变电压,同时电容恒定。
网友评论