一、物品准备：
1、抗凝取血管
2、2%台盼蓝溶液，1克台盼蓝配5ml纯水。
3、HBSS缓冲液、1083
4、EBM培养基，加入生长因子+10%FBS。
5、细胞记数板、电脑
6、离心机设置缓慢减速
7、房间紫外灭菌
二、取血（动物房）
1、兔子耳中动脉取血10ml,抗凝管每管2ml。
三、分离单核细胞（5810R房间）
1、HBSS稀释血液（可用可不用）
2、15ml管每管添加3ml1083，再再表面缓慢加入3ml血液，400Xg(rcf)30min离心。
3、用枪头缓慢吸出单核细胞，勿贪多。
四、接种细胞（细胞房）
1、培养皿提前1-2h用FN包被，有木有特异性？
2、用PBS清洗细胞，2-3次，1000转5min。
3、种板，3ml吹打细胞，6孔板，每孔2ml。
4、台盼蓝染色观察细胞活力，未染色细胞>95%。
5、观察细胞：铺路石样细胞，程团块状。
2017.07.13实验兔外周血EPCs分离培养
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2017.07.13
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本文标题：2017.07.13实验兔外周血EPCs分离培养
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