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慢病毒的背景知识

慢病毒的背景知识

作者: 不学无数YD | 来源:发表于2021-07-30 09:21 被阅读0次
  • 用于生产慢病毒质粒的菌株:
    由于慢病毒存在较长的末端重复序列,为了减少不稳定区域的同源重组频率,一般使用:NEB稳定细胞、invitrogen Stbi3.以维持重复序列和DNA产量。(如果质粒含有ccdb基因的网关盒,则需要ccdb存活菌株)
  • 生产病毒的细胞系:
    293T细胞系
  • 宿主决定因素:
    膜蛋白与宿主表面受体相互作用的能力,VSV-G包膜蛋白常用于慢病毒生产。
    -整合区域
    通常整合到转录活跃的基因中,偏好与目标物种无关。病毒整合酶在整合位点偏好中起作用,LEDGF/p75,即慢病毒拴系蛋白,将预整合复合物招募到转录单位并促进整合。
  • 驱动cDNA表达的启动子(即RNA pol II启动子)
    如CMV、RSV
  • 驱动shRNA的启动子(即驱动RNA pol III启动子)
    如U6、H1

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