近年来，类器官技术因其具有2D细胞及动物模型所不具备特点和优势，在国际上得到了广泛的关注和迅速的发展，类器官技术在癌症基础与临床研究、再生医学等领域表现出广阔的应用潜力和前景，接下来，我们会通过九问九答的形式为您揭开类器官的面纱。
1. 类器官是什么？肿瘤类器官又是什么？
类器官是一种利用成体干细胞体外培养出的3D细胞培养物。由于与对应的人类器官拥有高度相似的组织学特征，并能重现该器官的生理功能，类器官可作为多种疾病的体外模型，在干细胞与发育、再生医学、疾病研究、药物开发和精准医疗等多个方面拥有广泛的应用前景。肿瘤类器官是取材于患者的肿瘤组织，通过加入多种细胞因子培养的，与患者肿瘤高度一致的3D“微肿瘤”。
2. 在类器官模型研究中，最难的关键的技术点是哪些？
目前来说，对于整个培养条件的优化是整个类器官模型培养的一个主要点。科研用户的反馈问题，多数都是培养条件容易掌握不好，不清楚干细胞需要的具体条件刺激，容易加多或者加少，这个问题可以通过标准化试剂盒来解决。
3. 不同大小的类器官具有不同的生长速度吗？
是的，类器官的细胞团包括的细胞数量越多，生长速率越快。单个细胞或包含少数细胞的细胞团的生长速率要低得多（10-15%），但仍会生长。
4. 接种的最佳密度是多少？如果单孔中的类器官太多，是否可以在类器官完全成熟前提前传代？
最佳密度是在50 μL的dome（凝固的Matrigel液滴）中接种100个类器官。如果单孔太密，是可以提前进行传代操作的。
5. 患者来源的肿瘤类器官可以成为患者的试药替身吗？
因为肿瘤类器官不仅仅只是简单的肿瘤细胞团，它是和来源组织高度一致的3D微肿瘤，拥有和来源组织从基因水平，到细胞水平和组织病理特征多维度的一致性，它可以反映患者本人肿瘤的异质性。在特殊的3D培养体系中，能够高度模拟在人体内的作用。根据很多的研究表明，患者来源的类器官的试药结果和患者本身也具有较高的一致性。因此，我们说类器官目前是是比较好的试药替身，可以帮助患者找到最适合自己的药物。
6. 类器官培养成功的最佳指标是什么？
形态是类器官培养成功的关键因素，成熟的类器官具有一个暗腔，可以出芽，不过较深的内腔也意味着腔内储存了大量的细胞碎片和代谢废物，不利于类器官的生长。因此，需要及时判断类器官的生长状态，需要在内腔变得太暗之前进行传代。
7. 对不同接种密度的dome（凝固的Matrigel液滴），需加入不同体系的培养基吗？
建议所有密度的dome都使用相同体积的培养基。最佳密度：一个dome含有70-100个类器官。每个dome中的类器官数量偏多，营养物质消耗的速度就快，而且由于新陈代谢的增加，培养基会变黄，因此需要更加频繁地更换。如果类器官密度稀少(20个/dome)，消耗的养分较少，可以增加更换培养基的间隔时间。
8. 基因测序+类器官药敏联合检测有何优势？
类器官药敏和基因测序是两个不同的药物筛查维度。
类器官技术是通过培养出与体内高度一致的类器官，并观察药物对类器官的直接作用，来判断药物的敏感性，并能体现个体的差异性，直接前瞻性地为临床用药预测疗效，阴性预测率91%，阳性率高达71%以上，整体敏感度78%。肿瘤基因检测是从分子学病因上根据患者基因中的突变靶点推测可能有效的药物。这两种不同的技术可以在基因水平和细胞水平上互补，为临床治疗提供更多有效信息，实现真正意义上的精准化和个体化治疗。
大量临床案例证明，通过类器官检测，能够发掘出基因检测未能探测到的致病基因，一步到位提供精准的用药方案，避免延误患者治疗。针对某种突变靶点往往有多种用药选择，类器官药敏筛查结果可以在基因检测结果的基础上，为患者进一步锁定具体的有效药物。仅依靠类器官或者基因检测单一的筛药结果，都无法保证药敏结果与临床疗效100%匹配。因此如果临床可结合两者的优势，对两种维度的结果进行综合解读，互相验证，能够实现双倍精准为患者提供更有临床价值的个体化治疗方案。
9. 类器官既然是“试药替身”，那患者可以根据类器官药敏检测结果自己买药吗？
不建议。药敏结果不构成治疗建议，只是重要的用药参考。患者存在个体差异，并且肿瘤类器官药敏作为最前沿的体外检测技术，仍在不断完善中。药敏结果无法确保与实际用药效果完全一致，检测报告也仅供主管医生进行专业解读。临床治疗方案的选择，需要医生结合实际经验与治疗指南进行决定，不能仅根据某项检测结果自行买药。
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