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可以在下面查看 通过align import senqunce导入需要的测序后的报告序列 image.png

可以看到与野生型ubi对比，测序返回的ubi没有问题，完全匹配。K48只有48位的lys（AAG）变为了精氨酸(AGG)，K63只有63位的lys（AAG）变为了精氨酸(AGG)，所以这是两个只有K48, K63点位突变的ubi，就是K48R and K63R (精氨酸：R)。

正常是什么样子

下图可以看到，正常情况下，其实野生型ubi上是有很多Lys的。

野生型ubi

下图可以看到，K48不突变的ubi，其实是只有K48位的lys不突变，而其它位置的lys都发生了突变。反之，K48突变的ubi（K48R）就是只有K48位点发生了突变，别的位置不突变（K48R见上图）。

K48不突变

K63也是一样。K63不突变的ubi，只有K63位的lys不突变，而其它位置的lys都发生了突变。反之，K63突变的ubi（K63R）就是只有K63位点发生了突变，别的位置不突变（K63R见上图）。

K63不突变

所以，以K48为例，在实验中，做IP拉K48相关蛋白检测的就是发生K48泛素化的蛋白；做IP拉K48R相关蛋白时，就不会把发生K48泛素化的蛋白拉下来（反向验证）