生物实验原理整理

1.IP与co-IP:（用于研究蛋白质相互作用。。）
免疫沉淀和免疫共沉淀都是基于抗原抗体结合的特性来实现的。
IP：在琼脂珠上插满一种蛋白A/G，这种蛋白能够稳定的结合抗体的FC部（Y型的岔口处）。再接着抗体可以和特异的抗原结合。实验中，只要往含有目的抗原的溶液里加入对应的抗体，再通过离心，（珠子带着结合的抗原抗体在下面），就可以纯化得到自己的目的抗原。
co-ip：与IP唯一不同的是，IP的目的成为初级靶分子，co-ip的对象是次级靶分子，即 抗原X作用结合着的Y。

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图片来自文献 Snipaste_2020-05-27_22-00-26.png

2.LRA：luciferase reporter assay,荧光素酶报告实验。（用于测转录因子活性，作用强度。。）
利用荧光素酶催化荧光素发出荧光的特性。
实验上，就是构建一个报告基因的质粒，在靶启动子特定片段插到荧光素酶表达基因的前面，如果待测转录因子能够激活靶启动子，荧光素酶基因就会表达，荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比。再加入特定的荧光素酶反应底物，测荧光强度即可判断转录因子有无作用和作用强度了~

LAR_show.png
图片来自文献 Snipaste_2020-05-27_22-00-26.png

3.流式细胞仪检测细胞凋亡的原理：

flow_pi_Annexin V.png

4.基因编辑-crispr/cas9
crispr(clustered regularly interspaced short Palindromic repeats)一段规律/有间隔/短的/群集性/重复/回文 序列
cas9 = 一把能够剪短DNA双链的剪刀
sgRNA = 指引者
PAM motif = 身份证
综上：sgRNA带着cas9去特定切除持有身份证的靶向序列

5.生物膜干扰实验（分子结合）

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6.趋化性实验
趋化性是指，诱导细胞向趋化因子浓度高的方向移动。

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