激光共聚焦简明教程

激光共聚焦简明教程：

1. 按照操作规范，依次开启PC Microscope(显微镜) 、Scanner Power ( 扫描电源) 、Laser Power( 激光电源) 以及Laser Emission( 激光开关) 。
2. 启动LAS X 软件

• 在Configuration里面打开实验所需的激光；
• 根据不同的染色，选择SEQ序列扫描，并添加不同的通道；例如用了DAPI、FAM、cy3标记的脂肪体样本。因为不同染料对应的激发和吸收波长不同，而检测器上面设置波段的滑块是固定在检测器上的，所以必须注意的一点就是，按照波长顺序进行不同检测器上面的设置。

DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm；
FAM （羧基荧光素）激发波长 492 nm，发射波长 518nm；
cy3的最大激发波长为512nm，最大发射波长为570nm。

根据上面波段特性，我们设置了SEQ1设置为DAPI，SEQ2设置为FAM，SEQ3设置为cy3，

图片.png

在不同 SEQ序列上进行详细的参数设置，包括开启激光，波段滑块设置，Gain值等等，这是进行图像呈现的关键之关键。
由于HyD检测器较昂贵，一般PMT即可满足大部分实验需求，所以平台规定操作HyD需联系平台，所以切忌不要开启hyD检测器.