前三期视频,我们讨论了测序原始数据,原始数据的质控和过滤,以及拿到cleandata数据后与参考基因组比对获得测序序列在基因组中的位置来源。那么基因组比对后,如何获得基因的表达量信息呢?今天我们开始讨论RNAseq中最重要最核心的数据,基因的定量与差异表达基因的问题。
本节内容要点包括:
(1)基因表达定量的reads count值、FPKM值是如何获得的,代表了什么含义;
(2)基因表达定量结果中,FPKM值在多少是合适的,常见的持家基因、激酶、转录因子、lncRNA等的FPKM值通常保持在怎样的范围;
(3)如果关注的基因的表达值都是0怎么办,说明什么问题呢;
(4)文献刚刚发表的新基因,新转录本,能不能检测到表达量,有没有表达值;
(5)样品中有多物种的情况,比如人的样品中有细菌、病毒等,也想看一下病毒的基因的表达谱,能不能分析;
(6)常见统计图表解读,包括基因表达值的箱线图、主成分分析(PCA)、相关图等;
(7)微阵列芯片和RNA-seq的优缺点比较。
视频教程:
纪伟讲测序4-基因定量
bilibili超清视频链接:https://www.bilibili.com/video/BV1S5411p78m
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