-
过表达载体引物设计（在带有强启动子的载体上插入自己的基因）：
（1）载体同源臂序列（20 bp）+酶切位点序列（6 bp）+目的片段序列（18-22 bp）
F: 限制性内切酶前面的15-20 bp
R: 限制性内切酶后面的15-20 bp
载体同源臂序列取决于酶切位点
同源臂序列的确定.jpg
（2）酶切位点选择的原则：
（3）Primer 5 软件设计目的基因序列
a. 保证F引物从ATG开始；R引物跨终止子
b. F primer length (18-22/17-23 bp)
过表达载体引物设计（在带有强启动子的载体上插入自己的基因）：
（1）载体同源臂序列（20 bp）+酶切位点序列（6 bp）+目的片段序列（18-22 bp）
F: 限制性内切酶前面的15-20 bp
R: 限制性内切酶后面的15-20 bp
载体同源臂序列取决于酶切位点
同源臂序列的确定.jpg
（2）酶切位点选择的原则：
（3）Primer 5 软件设计目的基因序列
a. 保证F引物从ATG开始；R引物跨终止子
b. F primer length (18-22/17-23 bp)
质粒引物设计： 1. 质粒载体分类： （1）九种表达载体 Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-...
构建 lncRNA 过表达质粒或者慢病毒、腺病毒包装载体。原则上是将全长lncRNA 定向克隆到表达载体上实现 l...
In-Fusion方法及引物的设计 本章构建PHD2的重组表达载体时使用的是pET-43.1(+)系列中的pET-...
在测定基因表达量的过程中，如何设计合理的引物是需要解决的重要问题。当要对大量序列设计引物时（例如，对家族成员进行引...
使用NCBI进行目的基因的引物设计 全文概述 利用生信工具进行目的基因的引物设计，使用了NCBI进行筛选与设计引物...
PCR引物设计⑴ 确定PCR产物片段大小（product length）；⑵ 确定引物所在区段；⑶ 确定引物序列的...
shRNA：小发卡或短发卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA...
引物设计是PCR成功与否的关键因素之一。目前已经发表了上百种引物设计的软件，该如何选择这些PCR引物设计软件呢？此...
1.引物设计的基本原则是什么？ 引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 引物长度一般在15-30碱基之间。 引物G...
本文将介绍骨架载体+目的基因序列合成方法 在合成之前，应该先确定骨架载体backbone+基因序列。其中，骨架载体...
本文标题：过表达载体引物设计
本文链接：https://www.haomeiwen.com/subject/mzwkrdtx.html
网友评论