今天的实验又是大大大大大大大大失败。
为了减小DMSO的毒性，我把溶解好的R直接加到培养基里面，结果给板子换液的时候魔怔了，给对照组和溶剂组都换了有R的培养基，换到第二块板子才反应过来，这时候第二块板子已经加了一排了，于是我把这一排标记为R组，原来标记R组的那一排改成对照组，第一块板子把前两排对照组和溶剂组的含R培养基换成不含R的，原来标记的分组没有改。然后半小时后加M刺激，我又魔怔了，给第一块板子第一排的空白对照组加了M，于是不得已，我又把这一排换成M组，原来第二排是M组的改成空白对照组。于是这样两轮下来，第一块板子原本对照组、溶剂组、保护组的顺序从1、2、3变成了2、1、3，第二块板子则变成了3、2、1。
今天提蛋白和提RNA的时候我应该特别提醒自己不要搞错分组了的，但是还是有可能给我搞错了。因为今天跑qPCR，趋势十分好看，三组三组表达变化非常统一，然而这个完美好看的趋势完全反了，IL-1B的表达居然是保护组三组最高，溶剂组变低，这不是S基因应该有的趋势吗(╯‵□′)╯︵┻━┻所以我严重怀疑我提RNA的时候把溶剂组和保护组给搞反了……绝望啊QAQ
我决定明天去摸个M刺激的条件以及CCK-8……做个时间梯度和浓度梯度
呜呜呜，好心累QAQ，什么时候是个头。希望明天的蛋白不要让我太失望QAQ
未来几天的实验安排：
时间点：0、2、4、8、12、16、24、48、72
第一天：随便什么时候铺板，每个板铺十个孔，100/200都做一个孔
第二天：早上十点（72h）
第三天：早上十点（48h）
第四天：早上十点（24h）；下午18:00（16h）
第五天：早上9点（12h，板2）；早上十点收第一块板；13:00（8h）；17:00（4h）；19:00（2h）；21:00收板（板2）。
因为要养3天，所以建议接种3*10^5个
明天：WB，跑两块胶，一块跑今天提的9个蛋白，跑S/A/内参三个蛋白。另一块跑摸CC浓度的胶，加样之前根据上一次内参条带的浓度加。
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