主要内容包含核酸凝胶电泳,细菌转化,聚合酶链式反应技术(PCR),实时定量,基因组DNA文库的构建。
分享一个蓝白斑筛选的基础原理:
1.lacZ(特定序列的一段基因,存在于载体上)编码β-半乳糖苷酶;
2.IPTG诱导lacZ表达;
3.β-半乳糖苷酶水解X-gal底物,产生蓝色的溴氯吲哚;
4.当片段插入载体的时候破坏了lacZ编码,因此IPTG无法诱导lacZ序列表达,无法产生溴氯吲哚,呈现白色,没有成功连接载体时lacZ编码表达,酶水解X-gal底物,产生蓝色的溴氯吲哚,因此客户要挑白色的,因为它是插入成功的。
5.我们涉及到的产品:除了ct501和cb501的所有载体/IPTG/X-gal。
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