奶与奶制品中嗜冷假单胞菌的计数

2009年，ISO发布了ISO/TS 11059:2009，对奶与奶制品中嗜冷假单胞菌的计数方法进行了描述，通过该方法，能够对产色素和不产色素的嗜冷假单胞菌进行分离。该标准也适合乳业的环境样本。

乳业在我国发展迅速，而且品种丰富，包括液体奶（包括巴氏杀菌奶，超高温奶）、酸乳、冰淇淋、果汁果味乳、雪糕、酸乳饮料、麦乳精等。其中液体奶

占主要部分，巴氏杀菌奶又占液体奶的主要部分。在巴氏杀菌奶中，常常有低温菌的存在。低温菌即嗜冷菌，能在7℃以下繁殖。当冰箱中贮存的奶超过保存期，就会造成低温菌的大量繁殖，引起产品变质。乳被低温菌污染被认为是影响奶保质期的最为关键的因素。也就是说，耐冷假单胞菌被认为是巴氏杀菌奶最为重要的腐败菌。

ISO/TS 11059:2009即是对耐冷假单胞菌的检测和计数。其中分离假单胞菌的培养基推荐的是PPA平板，在25℃孵育48h，然后计数。保留菌落总数在150以下的平板，挑取5个菌落进行纯培养和验证试验。

验证试验包括氧化酶试验和葡萄糖发酵试验。氧化酶试验可使用氧化酶反应试纸，加样后如为阳性，则在5秒至30秒内试纸变为紫红色。葡萄糖发酵试验可使用葡萄糖琼脂，HiMedia货号是M1589，配方和ISO完全一致。假单胞菌为氧化酶试验阳性，葡萄糖发酵阴性。不过ISO也指出，某些假单胞菌菌株也可能在琼脂表面产生黄色。

PPA培养基也可从HiMedia购买，货号为M1788，品名为Penicillin

and Pimaricin Pseudomonas Agar Base，配合两个添加剂(货号FD 264和FD 265)

一起使用。假单胞菌如需进一步鉴定到种，可使用非发酵菌生化鉴定试剂盒（HiMedia货号KB019），该试剂盒包含24种生化反应，可鉴定的假单胞菌有19种。

HiMedia的假单胞菌显色培养基和假单胞菌分离琼脂同样值得注意。前者品名为HiFluoro

Pseudomonas HiVeg Agar

Base，货号是MV1469。该培养基含有特异性荧光剂，铜绿假单胞菌裂解荧光剂，从而紫外灯下发出荧光（下图左面）。后者（货号为M406）含有三氯生，一种广谱抗菌剂，但假单胞菌对其耐受，可以生长。

HiMedia公司是国际知名微生物产品生产商，一直致力于微生物培养基和细胞培养基的研发和生产，具有WHO GMP认证、ISO9001：2008，ISO13485：2003认证，CE认证和FDA注册登记。其产品行销全球140多个国家。