相同的呼吸道症状,病原因素各有千秋。育肥猪呼吸道综合症(PRDC)的元凶是谁?在哪里?今天给大家介绍一例后备母猪伪狂犬爆发案例... ...
2016年12月13日,我收到汤细彪博士转发过来的一条信息(如图):湖北某猪场后备母猪出现采食量下降、高烧、呼吸道严重、死亡症状,猪场负责人非常着急,请我们第一时间赶到现场。
由于接近年底工作总结会议,汤博士委派我和同事刘波两人处理这起疫情。我们当天下午在X市住下后,与猪场负责人H总见面,了解发病经过,并查看解剖猪只照片。
发病前口蹄疫、蓝耳苗、伪狂犬苗、圆环苗均已免疫两次,猪瘟苗免疫了一次当时我大致浏览了一下图片,发现有价值的解剖图片只有这三张:肺脏水肿、腹股沟淋巴结出血、肝脏似乎还有白点。我把H总的手机拿过来,放大看可惜还是不清晰。看来明天剖猪需要重点再关注下肝脏... ...
为了下午能把病料带回实验室,我们俩早上五点半便起床、退房,六点钟是司机已在楼下等待我们。出诊路上一般都是长途跋涉,但是想到养猪人平时起早贪黑,有疫情时更是茶饭不思,我们这点小困难就不算什么了。
半个小时的路程赶到猪场,洗澡消毒后进猪场,H总和技术负责人L总已在办公室等我们了。进入后备隔离舍后,先观察了猪群状态:大部分发病猪只扎堆、精神沉郁、耳朵发绀,尿液呈褐色体温现场测量两头分别是39.9和40.5,体温记录最高有41℃,乍一看还真像是蓝耳病或者高热病。
H总已经指挥大家将健康未生病的猪暂时隔离到另外一栋圈舍了。说句内心话,我这时也不知道猪群发病是什么原因(蓝耳?弓形体?巴氏杆菌?),其实我每次面对新的病例时心里都没底,但是我很快给出了诊断思路:①. 解剖2-3头发病猪/死亡猪,采集病料;②. 分别采集9份健康猪和9份发病猪血清(从ELISA对比抗体变化,从荧光定量PCR对比病毒血症变化);③.刚好我们推出了病理组织切片,可以再从切片角度进行论证(事后证明这真是明智之举!)
诊断思路和采样准确度比诊断方法、仪器、谁家试剂盒更重要!就像我们养猪一样,老板的眼光和心胸比用什么饲料、兽药、疫苗都重要。刚好昨晚又死亡了两头,我们进行了现场解剖:
或许您看到这里,会大声说:伪狂犬!!或许您在一个50头母猪场敢拍胸脯说,在一个500头母猪场敢肯定的说,但是在一个5000头母猪场呢?
我有时候很不解的是,存栏母猪几百头甚至几千头的猪场,发生了疫情后,老板或者场长不去找专业诊断机构进行实验室诊断,而在手机通讯录里搜到某个救命号码后,请老师来转一圈,剖两头猪,然后各种怀疑,恨不得相关病原怀疑一遍,继而各种方案(很多场请几个老师,几个方案同时开,无语啊),疯狂用药、打疫苗... ...
一激动又扯远了,呵呵。但是看到肝脏白点我还是比较激动,因为昨晚照片中出现了疑似白点。我想,把另外一头猪再剖开会不会有新发现呢?
右边肺脏呈黑红色,左边肺脏呈粉红色,是因为猪只死后侧卧淤血导致的。打开下颚,挖出扁桃体时松了一口气:果真有伪狂犬!(注意,我用的“有”,而不是“是”)。伪狂犬临床解剖特征:1.扁桃体坏死、溃烂;2.肝脏白色坏死点;3.肾脏出血。前两个特征有确诊的意义。
采集病料、血清后送至实验室检测,令人惊讶的是:1.伪狂犬gE抗体全阴性(使用进口试剂盒);2.荧光定量PCR没有检出伪狂犬病毒,反而检测到了圆环病毒;3.未分离到任何致病菌。
在进行血清学和病原学检测同时,我们病理室将送回的样品进行了病理组织切片制备。
解剖学明明发现了典型的伪狂犬病变,病原学却无法证实这一点,由于没有采集脑组织(天冷猪大没有锯,也是该案例遗憾之处),组织切片也不能完全确诊(不是病理学本身无法确诊,是因为采样的问题;如果有伪狂犬单抗,现有组织切片做免疫组化也应该可以确诊)。
这个结论下的没有问题,猪场圆环病毒感染是底色,同时感染了伪狂犬野毒,扛不住了,发病了!因为后续采取的措施证实了这一点。
整个疫情的发生到控制,仅仅花了10天的时间,如此成功关键在于我们实验室和猪场的高效沟通和信任(没有信任,就没有检测)。
诊断就是这样,必须到猪场,观察猪,咨询人(特别是饲养员)、解剖猪,实验室检测论证(切莫武断地说只查蓝耳,应将这一类病原逐一排查,同时结合几种实验室方法互相验证),下结论,给方案,看效果,调整方案、再进行实验室了解猪群状态。
诊断工作要想做好,哪里是一刀子下去,下两个方案,猪场就没事了的,猪群健康管理和监测本身就是一个长期跟踪、不断循环的过程。
今天说了很多大实话,最后啰嗦两点:1.蓝耳、伪狂犬、流行性腹泻阳性场一定不要任性地返饲、驯化,活毒感染其实就是散毒、扩大病毒量的过程(可能几百倍甚至几千放大),阳性场别玩火,亲们。2.该场后备母猪免疫进口巴萨珠疫苗后,伪狂犬gE阴性,gB抗体如此之好,却无法抵御伪狂犬病毒的攻击,说明巴萨株对我国目前流行伪狂犬病毒确实保护力有限(大量文章报告)。
许多伪狂犬阴性场朋友看到这里可能要呵呵了,说我在给XX疫苗代言吧。
或许只有经历了伪狂犬阴性场转阳性场的朋友们才知道其中的痛吧,人生就是这样,我们都要对自己的选择负责(又扯远了,呵呵)。
当然,这个案例还有很多未知之谜没有解开:1.为什么没有检测到伪狂犬病原?是样本的问题,还是发病期病毒拷贝数问题,还是实验室检测方法问题?2.到底还有没有其他病原参与进来?细菌性问题?(死亡猪使用过抗生素),弓形体?3.自然生产时,伪狂犬病毒天然感染(非实验室人工感染)免疫巴萨株疫苗的猪群后,排毒期多长?转阳时间多少天?
或许,这才是临床诊断的乐趣吧!
致谢
感谢华中农业大学动物疫病诊断中心病原室、血清室、病理室、细菌室各位同事的辛勤付出,感谢我的同事刘波陪伴一同采样,特别感谢诊断中心汤细彪博士和喻红艳老师对案例的支持和修改,感谢周诗其老师对病理切片的解读,也感谢两位微信老师对案例提出的宝贵意见,谢谢大家。
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