数据下载
for ((i=594;i<=670;i++));
do
wget ftp://ftp-trace.ncbi.nlm.nih.gov/sra/sra-instant/reads/ByStudy/sra/SRP/SRP105/SRP105176/SRR5479$i/SRR5479$i.sra;
done &
数据转换
ls *sra |while read id;
do
/home/chen/sratoolkit.2.8.2-ubuntu64/bin/fastq-dump --gzip --split-3 $id;
done &
数据质控
# Fastqc 进行质控
ls *fq | while read id; do fastqc -t 4 $id; done &
# multiqc:质控结果批量查看
multiqc *fastqc.zip --export &
数据过滤
## trimmomatic
# 安装 trimmomatic
wget -c http://www.usadellab.org/cms/uploads/supplementary/Trimmomatic/Trimmomatic-0.38.zip &
unzip Trimmomatic-0.38.zip
# 数据清理
# -threads 设置多线程运行
java -jar "/data/chen/biosoft/Trimmomatic-0.38/trimmomatic-0.38.jar" PE -threads 2 -phred33 \
# 2个输入文件
${name}_1.fq.gz ${name}_2.trim.fq.gz \
# 4个输出文件
${name}_R1.clean.fq.gz ${name}_R1.unpaired.fq.gz \
${name}_R2.clean.fq.gz ${name}_R2.unpaired.fq.gz \
# ILLUMINACLIP:去接头
# "$adapter"/Exome.fa :adapter 序列的 fasta 文件
# 2:16 个碱基长度的种子序列中可以有 2 个错配
# 30:采用回文模式时匹配得分至少为30 (约50个碱基)
# 10:采用简单模式时匹配得分至少为10 (约17个碱基)
ILLUMINACLIP:"$adapter"/Exome.fa:2:30:10 \
# LEADING:3,从序列的开头开始去掉质量值小于 3 的碱基;
# TRAILING:3,从序列的末尾开始去掉质量值小于 3 的碱基;
# SLIDINGWINDOW:4:15,从 5' 端开始以 4 bp 的窗口计算碱基平均质量,
# 如果此平均值低于 15,则从这个位置截断 read;
# HEADCROP:<length> 在reads的首端切除指定的长度;
# MINLEN:36, 如果 reads 长度小于 36 bp 则扔掉整条 read。
LEADING:3 TRAILING:3 SLIDINGWINDOW:4:15 HEADCROP:10 MINLEN:36
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