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一文解决Cellphonedb单细胞互作分析及可视化作图(1)

一文解决Cellphonedb单细胞互作分析及可视化作图(1)

作者: KS科研分享与服务 | 来源:发表于2022-08-10 12:57 被阅读0次

    CellPhoneDB作为出镜率很高的细胞互作分析工具,也是大家公认的。网上有很多教程,按理说在自己单细胞系列也应该出一个教程,但是由于CellPhoneDB是基于python,且需要涉及到Linux的操作,考虑到初学者小伙伴没有基础,一直搁浅。但是还是有小伙伴需要这个,也向我要了,所以我觉得还是有必要写一下,当然和以往一样,是详细注释版,一个一个的汉字,看完应该会清晰!

    既然网上有教程,为什么还要写,我想解决以下几个问题:

    1、很多人死在第一步:cellphonedb的安装,这个问题不得不解决,因为写教程的都是大佬了,但是我这里必要考虑初学者,所以要从源头解决问题。

    2、cellphonedb只能做人的,做鼠的则需要对基因转化,别傻傻的半天没有结果。

    3、因为cellphonedb分析操作很简单,数据整理好只需一行代码解决。后期的可视化都是可以在R中进行的。那么,这里我们需要为初学者解决的一个问题是没学过Linux,或者我就想运行一下得到结果,怎么办?所以用很笨的办法,跟着我的代码步骤即可,如果在你的过程中出现错误,学会百度,别人怎么解决你就怎么弄即可。不要问为什么这样,后期会出生物学人小白的Linux从一穷二白的入门!

    一、从你的电脑上找到Linux

    很多小白不晓得的问题是如何在windows下安装一个Linux,linux其实是一个操作系统,和windows一样,就是操作处理文件等等,现在windows10及以上可以安装Linux子系统(Linux也有桌面版,后续再说),打开Microsoft store, 检索ubuntu(linux的一个发行版,我想这么解释你就懂了,国产手机基本都用安卓系统,但是牌子有很多,你就把Ubuntu理解为牌子吧,背后的操作系统是Linux即可。只是我用的ubuntu,还有Redhat等等,自己选择)。点击安装,选择20或者18的版本都行。苹果操作系统请选择Centos等。

    image.png

    安装好之后,如何开启使用ubuntu(Linux系统),鼠标桌面右键---选择在终端中打开,我们就进入终端了,选择Ubuntu,进入Linux系统。

    image.png

    二、安装conda

    Conda百度百科的介绍是:Conda 是一个开源的软件包管理系统和环境管理系统,用于安装多个版本的软件包及其依赖关系,并在它们之间轻松切换。

    安装Conda的目的是为了方便我们后续软件安装。

    #安装下载及环境设置
    # 安装一个conda,为什么安装他可以理解为Rstuido之于R,后期在环境设置、软件安装上很方便。
    wget https://repo.anaconda.com/miniconda/Miniconda3-latest-Linux-x86_64.sh
    # bash安装,按照指引,都选yes,这样一些依赖的python包都安装了。
    bash Miniconda3-latest-Linux-x86_64.sh 
    #  激活conda环境
    source ~/.bashrc
    
    #设置镜像
    conda config --add channels r 
    conda config --add channels conda-forge 
    conda config --add channels bioconda
    conda config --add channels https://mirrors.bfsu.edu.cn/anaconda/cloud/bioconda/
    conda config --add channels https://mirrors.bfsu.edu.cn/anaconda/cloud/conda-forge/
    conda config --add channels https://mirrors.bfsu.edu.cn/anaconda/pkgs/free/
    conda config --add channels https://mirrors.bfsu.edu.cn/anaconda/pkgs/main/
    conda config --set show_channel_urls yes
    

    三、Linux下安装R

    cellphonedb带了作图功能,但是是依赖于R,所以需要我们提前安装一个R语言。安装过程出现各种错误,我遇到的都在下面,如果遇到新的,解决不了,请记得百度。最后百般折腾下,安装成功了,我只想说一句国粹,QTMD。我是选择本地安装。

    
    #下载R
    wget https://cran.r-project.org/src/base/R-4/R-4.2.1.tar.gz
    tar -zxvf R-4.2.1.tar.gz#解压
    cd R-4.2.1/
    ./configure #这一步肯定出错
    make这一步肯定出错
    make install
    ##########接下来就是各种解决问题,然后继续./configure,直到没有问题
    
    #apt安装出问题
    sudo apt-get update
    #error:configure: error: in `/home/tq/R-4.0.3':
    #configure: error: no acceptable C compiler found in $PATH
    Solution:sudo apt-get install gcc
     ./configure --prefix=/home/tq/R-4.0.3
    #error:checking whether  accepts -g... no
    #configure: error: No Fortran compiler found
    Solution:sudo apt-get install gfortran
    ./configure --prefix=/home/tq/R-4.0.3
    #error:configure: error: in `/home/tq/R-4.0.3':
    #configure: error: C++ preprocessor "/lib/cpp" fails sanity check
    Solution:sudo apt-get install gcc-c++
    ./configure --prefix=/home/tq/R-4.0.3
    #error:configure: error: --with-readline=yes (default) and headers/libs are not available
    Solution:./configure --with-readline=no --with-x=no
    ./configure --with-readline=no --with-x=no
    #error:checking whether zlib support suffices... configure: error: zlib library and headers are required
    Solution:sudo apt-get install zlib1g-dev
    ./configure --with-readline=no --with-x=no
    #error:checking whether bzip2 support suffices... configure: error: bzip2 library and headers are required
    Solution:sudo apt-get install libbz2-dev
    ./configure --with-readline=no --with-x=no
    #error:
    configure: error: "liblzma library and headers are required"
    Solution:sudo apt-get install libreadline-dev
    ./configure --with-readline=no --with-x=no
    #error:configure: error: PCRE2 library and headers are required, or use --with-pcre1 and PCRE >= 8.32 with UTF-8 support
    Solution:sudo apt-get install libpcre2-dev
    ./configure --with-readline=no --with-x=no
    #error:configure: error: libcurl >= 7.28.0 library and headers are required with support for https
    Solution:sudo apt-get install libcurl4-openssl-dev
    
    ./configure --with-readline=no --with-x=no
    R is now configured for x86_64-pc-linux-gnu
    
      Source directory:            .
      Installation directory:      /usr/local
    
      C compiler:                  gcc  -g -O2
      Fortran fixed-form compiler: gfortran -fno-optimize-sibling-calls -g -O2
    
      Default C++ compiler:        g++ -std=gnu++11  -g -O2
      C++14 compiler:              g++ -std=gnu++14  -g -O2
      C++17 compiler:              g++ -std=gnu++17  -g -O2
      C++20 compiler:
      Fortran free-form compiler:  gfortran -fno-optimize-sibling-calls -g -O2
      Obj-C compiler:
    
      Interfaces supported:
      External libraries:          pcre2, curl
      Additional capabilities:     NLS
      Options enabled:             shared BLAS, R profiling
    
      Capabilities skipped:        PNG, JPEG, TIFF, cairo, ICU
      Options not enabled:         memory profiling
    
      Recommended packages:        yes
    
    configure: WARNING: you cannot build info or HTML versions of the R manuals
    configure: WARNING: you cannot build PDF versions of the R manuals
    configure: WARNING: you cannot build PDF versions of vignettes and help pages
    
    #安装几个包
    sudo apt-get install libpng-dev
    sudo apt-get install libjpeg-dev
    sudo apt-get install libtiff-dev
    sudo apt-get install libcairo-dev
    sudo apt-get install libicu-dev
    
    make######又是错误
    #error:*** Cannot find any Java interpreter
    #*** Please make sure 'java' is on your PATH or set JAVA_HOME correspondingly
    #Makefile:87: recipe for target 'stamp-java' failed
    #make[1]: [stamp-java] Error 1 (ignored)
    #make[1]: Leaving directory '/home/tq/R-4.0.3'
    
    Solution:sudo apt install openjdk-11-jdk
    ./configure --with-readline=no --with-x=no
    
    make
    make install
    然后就可以了,我只想说一句国粹:TMD
    
    R --version
    R version 4.2.1 (2022-06-23) -- "Funny-Looking Kid"
    Copyright (C) 2022 The R Foundation for Statistical Computing
    Platform: x86_64-pc-linux-gnu (64-bit)
    
    R is free software and comes with ABSOLUTELY NO WARRANTY.
    You are welcome to redistribute it under the terms of the
    GNU General Public License versions 2 or 3.
    For more information about these matters see
    https://www.gnu.org/licenses/.
    
    #说明成功
    

    四、安装cellphonedb

    前面的问题解决了,就可以安装cellphonedb了。

    
    conda create -n cellphonedb python=3.9 #这里选择python版本,用最新的吧,没毛病。创建cellphonedb环境
    conda activate cellphonedb #激活环境
    pip install cellphonedb #安装,指定会出错
    
    #解决办法
    #可以不使用pip install cellphonedb,直接用下面这句代码安装
    pip install cellphonedb -i http://pypi.douban.com/simple/ --trusted-host pypi.douban.com
    
    #判断是否安装成功
    #运行
    cellphonedb --help
    #出现下面页面
    Usage: cellphonedb [OPTIONS] COMMAND [ARGS]...
    
    Options:
      --help  Show this message and exit.
    
    Commands:
      database
      method
      plot
      query
    #这样就没问题了
    

    这样分析环境就搭建好了,软件也没有问题了,数据分析就很简单了,代码就一句话的事情。我们下节继续。有说的不到位的地方,还请批评指正!

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