PBS:phosphate buffered saline,磷酸盐缓冲溶液
DPBS:Dulbecco's phosphate-buffered saline,杜氏磷酸盐缓冲溶液
PBS:PBS并没有明确记载的发明者和发明时间,最初的配方可以追溯到20世纪早期,当时科学家们利用磷酸盐在水中形成缓冲液,以保持化合物和微生物的稳定性。
DPBS:Dulbecco's phosphate-buffered saline当中的Dulbecco指Renato Dulbecco,是美国生物学家,曾获1975年诺贝尔生理学或医学奖。根据维基百科,DPBS最早出现在1954年的文章“PLAQUE FORMATION AND ISOLATION OF PURE LINES WITH POLIOMYELITIS VIRUSES”中。文中描述“Phosphate-Buffered Saline (PBS).--(a) NaC1 8.0 gm., KC1 0.2 gm., Na~-IPO4 1.15 gin. KH~PO4 0.2 gr., water 800 ml.; (b) CaC12 0.1 gin., water 100 ml.; (c) MgCI2.6H20 0.1 gm.. water 100 ml. Autoclave (a), (b), and (c) separately; mix when cooled.”
PBS(Phosphate-Buffered Saline,即磷酸盐缓冲液),能够提供相对稳定的离子环境和 pH 缓冲能力,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆等。
DPBS(Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline,即杜氏磷酸盐缓冲液),是用于短期维持细胞活性的一种平衡盐溶液。在有限时间内维持离体细胞结构和生理学上的完整性。pH 为 7.2-7.4,与人体 pH 相近,溶液渗透压与人体血液等渗,不含 Ca2+、Mg2+。适用于各种细胞培养应用,例如解离前清洗细胞、运输细胞或组织、稀释细胞进行计数和制备试剂。
DPBS 是细胞清洗、标本稀释的首选。与常规的PBS相比,DPBS 中不含 Ca2+和 Mg2+。Ca2+、Mg2+作为细胞膜的重要组成成分,参与细胞粘附等功能,使用不含 Ca2+、Mg2+的 DPBS 可避免细胞结团,维持细胞渗透压平衡,保持 pH 稳定,供细胞和组织一个相对稳定的离子环境;在细胞消化过程,如使用 PBS 进行清洗细胞,Ca2+的残留也会影响胰酶活性,致使细胞难以消化。
PBS与DPBS配方
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磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一,主要由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾组成,不含 Ca2+、Mg2+,pH 值为 7.4,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。经过除菌处理,可直接使用。
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总 结
PBS是一类磷酸盐缓冲溶液的总称,虽然有常用的配方,但并不局限于某一种。DPBS即是Renato Dulbecco根据自己的实验需求自行改进的一种PBS溶液,因较为常用,所以沿用下来成为相对固定的名称。本质上都属于磷酸盐缓冲溶液,根据常用的配方来看,两种溶液的成分基本一样,含量稍有不同。可以说DPBS是PBS的一种。
溶液中是否含有Ca+和Mg+并不是区分DPBS和PBS的决定性因素,开头引用的两种观点都不够客观。根据不同网站得到的PBS和DPBS的配方来看,PBS是不含有钙镁离子的,Renato Dulbecco发表在文章当中的DPBS是含有钙镁离子的。但DPBS的配方经过后人的改进,衍生出了不含有钙镁离子的DPBS。通俗一点说就是,常用的PBS都不含有钙镁离子,常用的DPBS有的有钙镁离子,有的没有钙镁离子。两者的关系如下图所示。
PBS和DPBS的关系
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根据几个比较有名的生物制剂公司的商品来看,基本都同时在售含有钙镁和不含钙镁的DPBS,还有添加了葡萄糖等其他成分的DPBS。所以不必以是否含有钙镁判断是否是DPBS,根据自己的需求选择对应配方即可,如果是购买商品化的试剂还是仔细检查商品的配方之后再购买。
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