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等了好久的B站TCGA笔记(1-2章)

等了好久的B站TCGA笔记(1-2章)

作者: 寥廓江天万里霜 | 来源:发表于2020-02-09 14:30 被阅读0次

B站视频地址:https://www.bilibili.com/video/av49363776?from=search&seid=17709076368945641839
特此致谢:生信技能树

101

需要了解的内容:TCGA的研究范围、数据来源、数据格式、数据储存、基本的生物学概念、肿瘤学知识、熟悉使用R语言

R语言教程:https://www.bilibili.com/video/av25643438?from=search&seid=2313097517440657329

102

配套代码:https://github.com/jmzeng1314/tcga_example 也可以把整个github上的代码打包下来(就是考验网速---事实证明:网速卒)

miRNA数据库:http://www.mirbase.org/

miRNA 的命名方式:(引自周凡,庄诗美.《microRNA与肿瘤》, 生命科学, 2008, 20(2):207-212. )

  • (1) miRNA 简写成miR,再根据其被克隆的先后顺序加上阿拉伯数字,如miR-21

  • (2) 高度同源的miRNA 在数字后加上英文小写字母(a、b 、c),如miR-199a 和miR-199b;

  • (3) 由不同染色体上的DNA序列转录加工而成的具有相同成熟体序列的miRNA,则在后面加上阿拉伯数字以区分, 如miR-199a-1 和miR-199a-2;

  • (4) 如果一个前体的2 个臂分别加工产生miRNA,则根据克隆实验,在表达水平较低的miRNA 后面加“”,如miR-199a和miR-199a,或进行如下命名,miR-142-5p(也可命名为miR-142-s,表示从5' 端的臂加工而来)和miR-142-3p(也可命名为miR-142-as,表示从3′端的臂加工而来);

  • (5) 将物种缩写置于miRNA 之前,如hsa-miR-195 ;

  • (6) 确定命名规则之前发现的miRNA,如let-7,则保留原来名字。

流程:

  • 下载数据

  • 提取表达矩阵、临床信息

  • 差异分析---count用DEG+limma;micro-reads用limma

  • 把每个结果存成Rdata

  • bach--logrank(去NA、修改变量名称、引入临床信息开始做生存分析---生存分析的几个统计学方法?

  • bach--cox(cox回归,探究多因素对生存期的影响)及森林图制作

  • LASSO回归(听说要用泰勒公式展开,先放着)

  • (还有很多可以做的,慢慢去开发)

103

TCGA的用法:用于验证自己的数据,或者做了数据挖掘后,进行临床验证,可以多组学、多平台联合分析。多读文献多开脑洞

听说技能树承包了你2020生物信息学文献 https://mp.weixin.qq.com/s/7nvBDPZb2uGVglwJE7p_Rw

201

数据权限: 3级、4级才能下载分析;1级、2级需要申请下载。

大家记得去扫视频4:36 的二维码 https://www.bilibili.com/video/av49363776?p=4

测序--比对(BWA)--去除重复---碱基校正---BAM---IGV可视化---QC---mutation(somatic--体细胞突变--仅存在于特定组织中,不遗传给后代;germinal--种系突变--全身大部分细胞都突变,且可遗传 )---indels/purity(可下载作为数据校正)、ploidy/CNV/rearrangements(结构变异)----annotation

六种数据:外显子、表达数据、甲基化、蛋白质、CNV、临床信息、miRNA

网页工具

  • GDC---目前TCGA的整合

  • cbioportal--按照文章来分

  • UCSC---可以用Python下载

  • FIREHOSE

  • oncolnc---看生存相关专用

  • gepia

  • tanric---lncRNA

  • TCIA---与TCGA配套的影像资料

  • ICGC---比TCGA更大

202

GTEx: 可以与TCGA联合做正常 对照组或eQTL的分析

203---Xena

不需要编程


acdb994b-aa04-4a6c-8b52-2226e1984d99-4204432.jpg

关于筛选空白样本(左侧有黑色边框即为保留的)


bc55e617-1ddd-4532-bb8f-421182ba9859-4204432.jpg

读取数据出现空值要设置 fill=F,去除含空值数据:na.omit(),去除特定行的办法如下


b82270cb-5a76-4dc5-a3df-c7a8c3346cc8-4204432.jpg

204

firehose:http://gdac.broadinstitute.org/

(鉴于它数据更新的慢而且我已经学会了GDC全套,所以各位看视频吧)

205

文章规律(还是那句话:多看文章,多开脑洞,让技能树的文献推送承包你今年的文献吧)

https://mp.weixin.qq.com/s/7nvBDPZb2uGVglwJE7p_Rw

第三章单独写一个

从未想到GDC下载到数据合并整理

整整让我费了好久的脑子(大概是太久没做了)

尤其是304节,我整整看了四五遍才大致理清楚要怎么做

结果:脑子:懂了没,赶紧做;手:不,你不会。

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