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CeleScope分析多样同测数据(Clindex混样数据)

CeleScope分析多样同测数据(Clindex混样数据)

作者: 熊猫人和熊猫猫 | 来源:发表于2022-01-13 13:50 被阅读0次

    Clindex多样同测试剂盒在实验过程中会构建一个转录组文库和一个tags文库,因此数据分析也就分为两个环节:
    (1) 单细胞转录组分析
    (2) tags文库分析
    本篇文章只介绍 tags文库数据分析,celescope分析单细胞转录组数据的教程链接 点击这里

    1. tag 文件配置(mapfile+run.sh)

    1.1 配置mapfile

    #tag_fastq_ID    tag_datapath    tag_sample_name    rna_sample_analysis_Path
    R211013006X1    /fastqs/tag_dir    tag_1    /xxx/sample1/06.analysis
    R211013007X1    /fastqs/tag_dir    tag_2    /xxx/sample2/06.analysis
    # 第一列 tag_fastq_ID:对应 tag_fastq文件的名称前缀
    # 第二列 tag_datapath:对应 tag_fastq文件的路径
    # 第三列 tag_sample_name:对应质控报告的名称
    # 第四列:对应与其“配对的”单细胞转录组分析 “06.analysis” 路径
    
    转录组分析截图

    1.2 配置barcode.fa文件

    因为在实验操作中,我们使用 不同的标签试剂(含有不同的sample barcode)标记样本,所以一定要记录每个样本使用的标签试剂所对应sample barcode序列(不然无法准确还原到对应样本)!

    如下为 barcode.fa 的一个示例文本:其中smk 对应 样本名称

    >SMK0
    GGGCGTCTGTGACCGCGTGATACTGCATTGTAGACCGCCCAACTC
    >SMK1
    TTCCTCCAGAGGAGACCGAGCCGGTCAATTCAGGAGAACGTCCGG
    >SMK2
    AGGGCTAGGCGTGTCATTTGGCGAGGTCCTGAGGTCATGGAGCCA
    >SMK3
    CACTGGTCATCGACACTGGGAACCTGAGGTGAGTTCGCGCGCAAG
    

    1.3 编辑运行脚本run.sh

    multi_tag\
    --mapfile ./tag.mapfile\
    --linker_fasta ./linker.fasta\
    --barcode_fasta ./barcode.fasta\ 
    --chemistry scopeV2.2.1\
    --dim 1\
    --fq_pattern L25C15
    --mod shell #
    

    2. 生成“命令文件”

    (1)激活celescope的环境conda activate celescope
    (2)运行run.sh sh run.sh
    很快运行完成,主要生成一个shell文件夹,其中会有一个以tag_1命名的shell脚本
    tag_1.sh的每行指令:对应每一步分析(质控报告的每一部分数据)

    3. 投递“命令文件”

    sh tag_1.sh
    运行方式和转录组类似
    运行获得的文件夹:

    运行获得的文件夹

    postscripts: github详细的指导链接 点击这里

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