杜松针叶精油化学成分的抑菌活性及其作用机理

杜松(Juniperus rigida Sieb.et Zucc.)是柏科刺柏属植物，属于北方园林绿化树种。杜松针叶和果实均可入药，在蒙药和藏药中主要用于治疗类风湿性关节炎、肾炎、水肿、布鲁氏菌病和其他与炎症相关的疾病。

杜松针叶精油化学成分的抑菌活性及其作用机理

杜松作为传统的中药、藏药和蒙药应用历史悠久，但目前对其化学成分、抑菌活性及其作用机理研究尚未见系统报道，因此，本研究主要对杜松针叶精油化学成分及含量进行了测定分析，评价了其精油对10种细菌的抑菌活性，在此基础上，探讨了杜松针叶精油的抑菌作用机制，获得主要结果如下：

1.采用超临界CO2萃取法提取杜松针叶精油，提取率为0.8%；采用GC-MS法分析了杜松针叶精油的主要化学成分，共有62种，主要为单萜类、倍半萜类、酯类、酮类化合物。其主要成分为石竹烯(13.11%)、α-石竹烯(11.72%)、石竹烯氧化物(10.34%)、反-(+)-橙花叔醇(6.57%)、大牻牛儿烯-D(6.52%)、芳樟醇(6.31%)等。

2.以10种细菌为供试菌种，对杜松针叶精油的抑菌活性进行了评价，结果表明，杜松针叶精油具有广谱的抑菌活性，其抑菌圈直径在8.05-16.00mm之间，肺炎克雷伯氏菌抑菌圈直径最大(16.00mm)，抑菌圈直径最小的是粪肠球菌(8.05 mm)。

采用琼脂稀释法测定了杜松针叶精油的MIC和MBC值，结果显示杜松针叶精油对10种细菌均具有显著的抑菌效果，其MIC和MBC值在3.125-12.50 mg/mL之间，所有供试菌种中，肺炎克雷伯氏菌的MIC和MBC值最小(均为3.125 mg/mL)，表明杜松针叶精油对肺炎克雷伯氏菌的抑制效果最为显著。

3.采用细菌生长曲线、测量细菌细胞膜渗透性、测量细菌蛋白质和扫描电镜观察细菌形态等几方面，探讨了杜松针叶精油的抑菌机理。

结果表明杜松针叶精油能显著抑制肺炎克雷伯氏菌的生长，不同浓度精油的作用效果差别较大；杜松针叶精油改变了细菌细胞膜的渗透性，使得细胞内容物外泄最终导致细菌死亡；杜松针叶精油能够抑制细菌细胞蛋白质合成；杜松针叶精油处理后菌体表面和内部结构均发生改变，菌体表现出皱缩、破裂、部分缺失等，从而导致了细胞内含物的泄漏。

以上表明，杜松针叶精油的抑菌作用主要是改变了细菌细胞膜的渗透性，使得细胞内容物外泄，并抑制细菌蛋白质合成，最终导致细菌死亡。